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[标本处理] 样本死细胞多如何解决?

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发表于 2019-7-2 15:03:00 | 显示全部楼层 |阅读模式
悬赏10流星未解决
本帖最后由 hongyu 于 2019-7-3 09:44 编辑

       我用流式检测脂肪组织的细胞,脂肪组织用胶原酶消化20min,每次图中都有很多死细胞,尝试过不裂红或减少裂红时间、减小摇床转速、动作轻柔,都没有用。这些死细胞会影响结果吗?请问各位前辈有没有什么建议能减少死细胞?由于死细胞太多,导致我要分析的细胞比例和数量都很少。文献中的图为图2,目标细胞比例还是挺多的。
图1.JPG 图2.JPG


图2.JPG
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发表于 2019-7-3 11:26:48 | 显示全部楼层
看文献的图,似乎分布差不多嘛,可能你们还是得根据特异性标记,反圈门,确定脂肪细胞位置。
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发表于 2019-7-5 15:35:48 | 显示全部楼层
可以看看缓冲液的pH,以及离心转速和时间
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发表于 2019-7-7 10:37:37 | 显示全部楼层
如果经费充足,可以尝试用LS柱子(miltenyi分选细胞用的)过一下,试一下应该可以去除较多的死细胞碎片。
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