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[功能检测] ROS检测加入探针后,到底多久检测合适呢

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发表于 2019-7-2 20:52:29 | 显示全部楼层 |阅读模式
悬赏1流星已解决
请问一个问题单纯检测ROS,加入DCFH-DA探针后,多久上机合适,如果一批样有40个,那需要几个几个一起处理吗,需要保证探针作用的时间一致?

另一个问题:如果在检测ROS的同时也检测了其他marker,那怎么操作呢,先加探针,然后再染表面marker?这个时间又分别是染色多久呢?

感觉很多问题,希高手一一回答一下,Thanks

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可参考一下这篇文章:https://doi.org/10.1016/j.jim.2013.02.005 ROS探针(他们用的是C11-BODIPY)与细胞37度孵育30分钟后,放冰上即可终止反应。所以应该问题也不太大。 至于CD45等其它表面Marker染色,这篇文章里面没写,但是其方法学部分明确写了,与ROS探针孵育前,先用氯化铵裂解液裂解红细胞,因此,这就意味着你可以先标表面标记,然后再红细胞裂解、调整细胞浓度,最后标ROS探针。 ...
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发表于 2019-7-2 20:52:30 | 显示全部楼层
可参考一下这篇文章:https://doi.org/10.1016/j.jim.2013.02.005
ROS探针(他们用的是C11-BODIPY)与细胞37度孵育30分钟后,放冰上即可终止反应。所以应该问题也不太大。
至于CD45等其它表面Marker染色,这篇文章里面没写,但是其方法学部分明确写了,与ROS探针孵育前,先用氯化铵裂解液裂解红细胞,因此,这就意味着你可以先标表面标记,然后再红细胞裂解、调整细胞浓度,最后标ROS探针。
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发表于 2019-7-9 10:17:03 | 显示全部楼层
niwanmao 发表于 2019-7-2 20:52
可参考一下这篇文章:https://doi.org/10.1016/j.jim.2013.02.005
ROS探针(他们用的是C11-BODIPY)与细胞3 ...

感谢分享
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