感觉各类标记分群都不明显，请各位老师帮我看看

cmuluo · 发表于 2019-8-23 10:36:15

本帖最后由 cmuluo 于 2019-8-23 10:35 编辑

我用中文网上推荐的魔滤和魔杵研磨细胞，所有抗体都是用的Biolegend的，但是做出来感觉有些不对，特别是CD3，感觉分不开，其他的稍好一些，但是还是不明显，请老师帮我看看。
因为魔杵的效率比较高，我觉得是不是细胞数太多了，流式抗体的量可能太少了，会出现这种情况么？

CD4单染

CD4单染

CD3单染

CD45单染

肿瘤组织MIX，CD8没有染上确实是因为我的抗体加少了很多

CD45、CD3、CD4、CD8多染

niwanmao · 发表于 2019-8-25 17:09:53

FCS文件能否发一下上来？另外，各个坐标的抗体名称能否标一下？
此外，我需要知道你的染色体积是多少？抗体用量是多少？

cmuluo · 发表于 2019-8-26 09:11:14

niwanmao 发表于 2019-8-25 17:09
FCS文件能否发一下上来？另外，各个坐标的抗体名称能否标一下？
此外，我需要知道你的染色体积是多少？抗体 ...

谢谢倪老师，我后面发现我的FSC和SSC的电压有问题，等我重新做一遍，如果有问题再来请教您。

stf1990 · 发表于 2019-8-26 20:44:48

此外，我觉得你可以把FACs文件用flow Jo打开再看一下，有时候在机器上看分群跟用软件有很大不同

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