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[淋巴细胞相关] 关于肺脏淋巴细胞的分离

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发表于 2019-9-11 14:53:31 | 显示全部楼层 |阅读模式
1流星
各位老师:
      最近想分离鸡的肺脏淋巴细胞,查资料看到需要用胶原酶消化,但是胶原酶分好几种,想问下到底应该用胶原酶I到V的哪一种好用,还有就是分离消化后打散的细胞还需要密度梯度离心获取淋巴细胞吗?

发表于 2019-9-11 15:40:56 | 显示全部楼层
同样想问,用密度梯度离心分离过脑脊髓的,效果非常不好,分离出的细胞少,后面还有一个实验要分离肾脏的淋巴细胞,愁
 楼主| 发表于 2019-9-11 20:36:41 | 显示全部楼层
h951595223 发表于 2019-9-11 15:40
同样想问,用密度梯度离心分离过脑脊髓的,效果非常不好,分离出的细胞少,后面还有一个实验要分离肾脏的淋 ...

你用什么来消化组织呢
发表于 2019-9-12 09:14:57 | 显示全部楼层
胶原酶1或各种组合均可,详见我们之前整理的完整的组织消化手册:http://www.flowcyto.cn/bbs/thread-5834-1-1.html
点击“肺组织”就可以看到底部列表各篇文献的方案
 楼主| 发表于 2019-9-12 11:32:52 | 显示全部楼层
niwanmao 发表于 2019-9-12 09:14
胶原酶1或各种组合均可,详见我们之前整理的完整的组织消化手册:http://www.flowcyto.cn/bbs/thread-5834- ...

倪老师您好:
      肺脏组织消化后得到的单细胞悬液很多都不是淋巴细胞吧.如果分离单个核细胞是不是要梯度离心一下比较好
发表于 2019-9-13 22:00:33 | 显示全部楼层
行棋无悔 发表于 2019-9-12 11:32
倪老师您好:
      肺脏组织消化后得到的单细胞悬液很多都不是淋巴细胞吧.如果分离单个核细胞是不是要梯 ...

梯度离心,容易导致丢失,你可以直接300目滤网过滤吧
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