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[流式相关软件] T淋巴细胞分型流式数据处理

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发表于 2019-10-4 23:57:34 | 显示全部楼层 |阅读模式
1流星
我第一次做提取荷瘤小鼠肿瘤组织及脾脏的T淋巴细胞,并用APC-CD3, PE-CD4和FITC-CD8抗体标记,我是在BD FACS Calibur仪器上测的,在仪器上我就调节了补偿,大概FL2-FL1 22%左右,图1是脾脏的T淋巴细胞圈门,然后是两个细胞分群的图,我发现左下象限的数据压轴很严重,我也不知道可以怎么在软件上调整,请各位老师帮忙指点一下。
图4是肿瘤细胞圈淋巴细胞的门,出来的结果(图5)就更丑了, 没有文献里细胞分群的图好看,不知道该怎么办了。
我是学材料的,第一次做淋巴细胞分群的实验,各位老师大家帮帮我吧

1 脾脏T细胞圈门.jpg
2 CD4CD3.jpg
3 CD4CD3.jpg
4 T cell in tumor.jpg
5 肿瘤中淋巴细胞分群.jpg
发表于 2019-10-6 07:26:32 | 显示全部楼层
坐标轴改成Biexponential双指数显示
发表于 2019-10-6 14:59:51 | 显示全部楼层
从细胞分布看,电压再调上去容易使阳性信号跑外面去,所以这样是可以的。
压轴,问题不大,是承认的。
 楼主| 发表于 2019-10-9 11:12:11 | 显示全部楼层
niwanmao 发表于 2019-10-6 14:59
从细胞分布看,电压再调上去容易使阳性信号跑外面去,所以这样是可以的。
压轴,问题不大,是承认的。 ...

非常感谢老师的回复,还有一个问题想请教老师,我这个实验因为有补偿,一般是在上机的时候调补偿好呢,还是回来在Flow Jo上调补偿好呢,还是上机的时候调好补偿之后,在Flow Jo上还可以再调一下补偿呢,谢谢老师回答
发表于 2019-10-10 08:02:10 | 显示全部楼层
小哈happy哈 发表于 2019-10-9 11:12
非常感谢老师的回复,还有一个问题想请教老师,我这个实验因为有补偿,一般是在上机的时候调补偿好呢,还 ...

可以拿回来再调补偿。
上机的时候关注阴性细胞位置即可,不要太高,也尽量不要压轴了。
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