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[结构和原理] CAR-T检测B细胞比例相关问题

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发表于 2019-10-9 09:25:58 | 显示全部楼层 |阅读模式
5流星
本帖最后由 www 于 2019-10-9 09:28 编辑

求助:近期检测CAR-T中的B细胞比例,采用CD3/CD19进行染色,总会出现如下情况,CD19+在CD3+之上,有点感觉CD3+CD19+细胞群,又没有同时表达CD3和CD19细胞群,会不会是B细胞与T细胞binding或者其他问题呢?

图片1.png
图片2.png
发表于 2019-10-9 09:41:14 | 显示全部楼层
试着分析下粘连体?另外补偿调节有问题吗?
 楼主| 发表于 2019-10-9 14:41:59 | 显示全部楼层
112358answer 发表于 2019-10-9 09:41
试着分析下粘连体?另外补偿调节有问题吗?

已经去过黏连体了。补偿没有问题,其他的表型,相同荧光下都是正常的位置,每次都只有CD19偏向CD3。
发表于 2019-10-9 15:03:17 | 显示全部楼层
两幅图是两个样本?
 楼主| 发表于 2019-10-9 16:07:38 | 显示全部楼层
niwanmao 发表于 2019-10-9 15:03
两幅图是两个样本?

是的,倪老师。不同的CAR-T样品,经过几次试验,都是同样的现象出现。
发表于 2019-10-10 07:54:22 | 显示全部楼层
www 发表于 2019-10-9 16:07
是的,倪老师。不同的CAR-T样品,经过几次试验,都是同样的现象出现。

图1还正常的,只是整体右移,倒是图2,我觉得可能是非特异性增高。
你的染色方案一共哪几个荧光素抗体?补偿有没有影响?
 楼主| 发表于 2019-10-10 08:49:54 | 显示全部楼层
niwanmao 发表于 2019-10-10 07:54
图1还正常的,只是整体右移,倒是图2,我觉得可能是非特异性增高。
你的染色方案一共哪几个荧光素抗体? ...

这个方案只包括FITC和PE,就染了CD3和CD19而已。另外也采用BV421和APC-Cy7染CD3和CD19也是同样的偏移情况。同时以一样的补偿应用至CD4-FITC和CD8-PE是正常,是没有这种情况的。
发表于 2019-10-10 08:57:16 | 显示全部楼层
细胞群有倾斜,建议FITC-PE补偿看看
发表于 2019-10-10 08:58:51 | 显示全部楼层
www 发表于 2019-10-10 08:49
这个方案只包括FITC和PE,就染了CD3和CD19而已。另外也采用BV421和APC-Cy7染CD3和CD19也是同样的偏移情况 ...

流式细胞仪是什么机型?
 楼主| 发表于 2019-10-10 09:26:40 | 显示全部楼层
木棉 发表于 2019-10-10 08:57
细胞群有倾斜,建议FITC-PE补偿看看

已经补偿了的结果
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