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可能近一半抗体无法得到预期理想效果,抗体验证很重要

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发表于 2019-10-28 10:12:45 | 显示全部楼层 |阅读模式

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流式细胞术已发展成为免疫和血液系统研究和临床研究中必不可少的技术,在其他细胞生物学学科中的应用也越来越多。 在该技术的实际应用中,有三个主要支柱,即仪器、分析方法以及试剂。 尽管仪器改进显著,高通量数据分析技术也有了显著发展,但最后一样始终无法得到足够改进的就是抗体。

以下多篇文献表明,目前在售的或者学术文献描述的抗体中,有将近一半不能用于推荐的应用,这些抗体要么染色模式与文献报道的染色模式冲突,要么出现意外的交叉反应性,甚至没有通过最基本的特异性测试。
Roncador G, et al. The European antibody network’s practical guide to finding and validating suitable antibodies for research. MAbs 2016;8:27–36.
Bordeaux J, et al. Antibody validation. Biotechniques 2010;48:197–209.
Andersson S, et al. Insufficient antibody vali- dation challenges oestrogen receptor beta research. Nat Commun 2017;8:15840.
Freedman LP, et al. The economics of reproducibility in pre- clinical research. PLoS Biol 2015;13:1–9.
越来越令人担忧是,其他研究小组无法重现结果,包括在高影响力期刊上发表的数据。 因此目前认为,抗体在某种程度上是造成实验结果不一致以及科学文献中数据不正确的原因。

近年来,行业和学术团体都加大了努力,以提高抗体验证过程的质量,并将其抗体验证数据提供给用户。但是,在制造商的验证水平以及如何传播此信息方面尚未达成共识。虽然已经出现了抗体验证的新方法,能够对靶标的评估更深入和更确定,但这些方法中有些相当昂贵,厂家对高质量验证的需求必须与抗体的成本之间要做个平衡。
重要的是,对于用户而言,从300多家抗体供应商中选择最佳抗体并不容易。
因此,本文的目的是描述用于流式细胞术的抗体验证的基本原理,并讨论哪种抗体验证方法是优选、可接受和可行的。
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