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[图片] 抗原特异性T细胞,不同的功能检测方法、检测标记及其缺点

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发表于 2019-10-30 08:52:03 | 显示全部楼层 |阅读模式

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由于抗原特异性T细胞很少见,因此抗原特异性细胞检测时,希望在每个抗原特异性T细胞中分析尽可能多的参数。
可以通过肽/ MHC(pMHC-多聚体直接标记特定的T细胞。但是,只能为有限数量的预定义pMHC组合生成pMHC-多聚体,尤其是对于MHC I类肽和CD8 T细胞分析。相反,用于鉴定抗原特异性CD4 T细胞的MHC II类多聚体仍不太成熟。此外,四聚体的使用仅限于复杂抗原或未充分表征的抗原,例如微生物、肿瘤或自身抗原以及人类的异质MHC背景。
作为替代方案,功能测试提供了更大的灵活性,因为它们依靠自体APC刺激T细胞,而自体APC可以在生理MHC背景下处理和呈递所有类型的抗原、肽、蛋白质或粗制细胞提取物。体外抗原刺激后,将抗原诱导的T细胞反应作为间接结果进行分析,表明特定的T细胞,即增殖、活化诱导的表面或分泌的分子或细胞毒性,从而反映抗原特异性T细胞的功能和/或数量。
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那么,各种方法之间,分别有哪些差别,刺激的亚群有哪些不同,有哪些缺陷呢?下表总结了这些内容,对做抗原特异性T细胞的FLOWER相信帮助挺大:
20191030_084331.png


图片来源:Guidelines for the use of flow cytometry and cell sorting in immunological studies (second edition). Eur. J. Immunol. 2019. 49: 1457–1973



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