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[其它] RO 即受体占位的相关检测讨论

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发表于 2019-10-30 10:16:26 | 显示全部楼层 |阅读模式
1流星
Hi 各位老师,
在站里一直没有看到RO即受体占位检测的相关问题讨论,但其实RO的检测近几年慢慢已经越来越多了。其实检测方法和内容都很简单,但因为面对的大多是各个公司自主的抗体产品,质量层次不齐,不论是免疫原性还是特异性,已经配套的二抗都很需要前期预实验的确定。目前我们经常遇到的问题是RO最终的值往往会高于100%,当然这跟是percentage还是MFI等统计方法是有关的,但往往影响最大的依然是抗体本身的特性。
评论中附上几篇文献供大家参考。有一起做RO的同仁我们可以一起讨论,规范化优化这个检测项目。谢谢


 楼主| 发表于 2019-10-30 10:18:26 | 显示全部楼层
本帖最后由 毛豆24821 于 2019-10-30 10:19 编辑

文献,其中也有RO大于100%,不太理解

Keytruda药理毒理研究文件.pdf

2.97 MB, 下载次数: 16

RO>100%

 楼主| 发表于 2019-10-30 10:20:53 | 显示全部楼层
第二篇文献,供大家参考,学习还是很美丽的事

receptor occupancy,02.pdf

1.84 MB, 下载次数: 23

 楼主| 发表于 2019-10-30 10:21:21 | 显示全部楼层
第三篇文献,供大家参考,学习还是很美丽的事

receptor occupancy.pdf

999.21 KB, 下载次数: 14

 楼主| 发表于 2019-10-30 10:22:13 | 显示全部楼层
第四篇文献,供大家参考,学习还是很美丽的事

RO.pdf

1.65 MB, 下载次数: 21

这个很全

 楼主| 发表于 2019-10-30 10:27:18 | 显示全部楼层
请教,各位,每一个sample的背景MFI(blank)是否是必须的?
Receptor Occupancy(%)=MFI(sample)-MFI(blank)
                                         MFI(饱和值)-MFI(blank)
发表于 2019-10-31 17:08:47 | 显示全部楼层
毛豆24821 发表于 2019-10-30 10:27
请教,各位,每一个sample的背景MFI(blank)是否是必须的?
Receptor Occupancy(%)=MFI(sample)-MFI(bl ...

也看过一些文献,也安评中心的一些检测,都是需要减去MFI(0浓度值),具体还需要学习
发表于 2019-11-1 21:04:59 | 显示全部楼层
毛豆24821 发表于 2019-10-30 10:27
请教,各位,每一个sample的背景MFI(blank)是否是必须的?
Receptor Occupancy(%)=MFI(sample)-MFI(bl ...

未做过,但看了你发的资料之后,大概了解了。
那么这条记录公式我觉得应该是合理的,减去Blank的MFI是必须的
 楼主| 发表于 2019-11-4 15:18:28 | 显示全部楼层
niwanmao 发表于 2019-11-1 21:04
未做过,但看了你发的资料之后,大概了解了。
那么这条记录公式我觉得应该是合理的,减去Blank的MFI是必 ...

MFI适用于没有明显阳性群的,有的时候是一部分有阳性群,有的是整体右偏,对于处理数据来说就不知道该用整体的MFI还是阳性群的percentage去做分析?
发表于 2019-11-5 08:58:30 | 显示全部楼层
毛豆24821 发表于 2019-11-4 15:18
MFI适用于没有明显阳性群的,有的时候是一部分有阳性群,有的是整体右偏,对于处理数据来说就不知道该用 ...

任何一个方法,我觉得首先做同一批样本多做几次,如果重复出来都是一样的结果,就可信。我现在怀疑的是方法步骤上是不是存在什么不稳定因素导致你的结果千差万别?
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