做流式测CD4，CD8，Treg，每个单染管必须是统一个样本吗？

yiyicao

要去小鼠外周血，测的指标多，因为染色管太多我又是抽小鼠的外周血，怕抽太多小鼠不行，可以用对照组小鼠血染单染管，然后只有待测管用实验组的血染可以吗？每个单染管也不一定要同一个样本吧？

niwanmao

CD4和CD8分群非常清楚，不需要用单染管，补偿可直接调。
Treg的话，我不知道你用什么标记，如果用FoxP3，那么还是需要做一管FMO对照的。

yiyicao

niwanmao 发表于 2019-11-5 08:59
CD4和CD8分群非常清楚，不需要用单染管，补偿可直接调。
Treg的话，我不知道你用什么标记，如果用FoxP3，那 ...

我用的CD4 FIFC RM4-5  和CD8a APC5.3-6.7 ，试剂商又说两荧光素有补偿，要单染管

niwanmao

yiyicao 发表于 2019-11-5 16:57
我用的CD4 FIFC RM4-5  和CD8a APC5.3-6.7 ，试剂商又说两荧光素有补偿，要单染管

你这两个荧光素是什么？怎么这么怪。
一般是FITC、APC，或者APC-A700、APC-cy7等，没看到过你这个样子。

yiyicao

niwanmao 发表于 2019-11-5 21:35
你这两个荧光素是什么？怎么这么怪。
一般是FITC、APC，或者APC-A700、APC-cy7等，没看到过你这个样子。 ...

这两种，我打错了

yiyicao

niwanmao 发表于 2019-11-5 21:35
你这两个荧光素是什么？怎么这么怪。
一般是FITC、APC，或者APC-A700、APC-cy7等，没看到过你这个样子。 ...

应该就是FITC和APC

niwanmao

yiyicao 发表于 2019-11-7 11:11
应该就是FITC和APC

这两种荧光素无补偿，不用单染。

yiyicao

niwanmao 发表于 2019-11-7 13:55
这两种荧光素无补偿，不用单染。

那如果有补偿需要单染的情况下，阴性管和单染管必须和待测管的血来自同一个样本的吗？可以来自多个不同的实验组老鼠的血吗？对结果有影响吗

niwanmao

yiyicao 发表于 2019-11-8 18:06
那如果有补偿需要单染的情况下，阴性管和单染管必须和待测管的血来自同一个样本的吗？可以来自多个不同的 ...

同种小鼠，不同药物处理，并且药物不影响荧光的问题下，可以用其它小鼠样本。

vivi2222

niwanmao 发表于 2019-11-10 16:37
同种小鼠，不同药物处理，并且药物不影响荧光的问题下，可以用其它小鼠样本。 ...

老师你好，麻烦问下：CD14-PE；CD11b-FITC 双染细胞，这两种荧光素需要做单染 调节补偿吗？ 第二个问题：一起染这两种染料的同时，可以一起加入染色吗？还是需要先染色一个，PBS洗涤 再染色第二个？