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流式细胞术在软体动物免疫学中的应用:现状和趋势

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发表于 2019-11-5 09:48:35 | 显示全部楼层 |阅读模式

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流式细胞术(FCM)是一种非常强大的细胞分析方法,它快速、准确、易于使用,并且可以同时测量多个细胞参数。 自从1953年第一台基于阻抗的流式细胞仪设备问世以来,现代流式细胞仪已有70多年的历史。 仪器、软件和荧光染料化学的最新进展已导致FCM在许多领域中的应用出现,包括血液学、食品工业、病毒学、病理学、植物生物学、海洋生物学、分子生物学和免疫学。

在免疫学研究中,FCM是用于基础研究和应用研究(尤其是临床研究)的标准实验室工具。免疫学家使用FCM分析特定的细胞亚群,并测量多种细胞计数参数,例如膜表面和细胞内特征、细胞死亡、吞噬作用、自噬、mRNA、转录因子、信号转导途径、淋巴细胞代谢。在软体动物免疫学研究中,自1990年代以来,FCM已被用于研究血细胞,但主要是在双壳类动物中。 FCM在腹足动物中的应用主要出现在2000年代。在这些早期应用中,FCM主要用于鉴定细胞群和生存力。目前,FCM的用途已扩展到软体动物免疫学的更多参数,包括细胞计数和活力、细胞类型、吞噬作用、氧化应激、细胞凋亡、DNA和蛋白质含量。但是,与脊椎动物免疫学中使用的FCM参数相比,软体动物物种的免疫学研究中使用的FCM参数数量有限。
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在脊椎动物中,FCM在免疫学研究中的可测量参数越来越多,但是,在软体动物免疫学研究中,可使用的FCM参数少得可怜。 对于海洋科学家来说,这是一个很好的机会,可以继续探索现代FCM能够为软体动物免疫学提供的素材。 但是,缺乏用于软体动物血细胞的标准化细胞参考品仍然是开发和验证新检测方法的一大挑战。 在当前使用的参数中,只有活力力和细胞亚群已得到验证。 目前,尚无关于用于软体动物的FCM方法验证的指南。 因此,有必要对软体动物免疫学研究中使用的众多FCM分析进行适当的验证。

编译自:Thao Van Nguyen, Andrea C. Alfaro. Applications of flow cytometry in molluscan immunology: Current status T and trends. Fish and Shellfish Immunology,94 (2019) 239–248,略有删减。
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