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标题: YFP流式检测的时候应该用哪个通道 [打印本页]

作者: steven 时间: 2022-9-29 11:08
标题: YFP流式检测的时候应该用哪个通道
大家好，想问一个基础问题。

现在培养的细胞表达YFP，流式检测的时候应该选择哪个通道呢？或者说和哪些常用染料的检测通道是一致的呢？

作者: Climber 时间: 2022-9-29 11:08
首先最大激发波长是513nm 用488激发是完全可以的，最大发射波长在527nm 对于大多数流式细胞仪而言，其通常对应为488激光的第一个通道，也是FITC对应的通道。FITC通道这个描述并不合理，通道对应的是能够接收一定范围波长的光而不是特指某个特定的荧光素。这里推荐一个网站可以查到绝大多数荧光蛋白的光谱图以EYPF示例：https://www.fpbase.org/protein/eyfp/

作者: 可以啦希希 时间: 2022-9-29 13:19
和GFP一样的，用FITC就可以吧

作者: steven 时间: 2022-9-30 08:33

可以啦希希发表于 2022-9-29 13:19
和GFP一样的，用FITC就可以吧

谢谢。确实和GFP很相似，但是稍微有些差异，所以不知道具体该用哪个通道。
如果仪器没有专门的YFP检测通道的话，用FITC通道替代是常规做法吗？

作者: steven 时间: 2022-10-17 10:08

Climber 发表于 2022-10-3 10:49
首先最大激发波长是513nm 用488激发是完全可以的，最大发射波长在527nm 对于大多数流式细胞仪而言，其通常 ...

感谢回复，因为有的流式仪配备专门检测YFP的通道以和GFP区分，所以不敢确定是否可以用FITC替代检测YFP。看了大家的回复，已经比较清晰了，感谢。

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