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标题: PerCP-cy5.5跟APC能一起用吗？ [打印本页]

作者: culturelily 时间: 2015-5-5 12:14
标题: PerCP-cy5.5跟APC能一起用吗？
我在配色的时候，已经用了PE\FITC\APC\EFLUOR450\APC-CY7
现在还想加一个颜色，选了PerCP-cy5.5，然后发现跟APC的补偿可能太高。
还能再加什么颜色比较好呢？
机器型号为CYAN-ADP，理论上3激光9色。

作者: a86856635 时间: 2015-5-5 12:14
PerCP-cy5.5在APC通道会有一些荧光渗漏，但不是很多。稍微调一下补偿就OK了

作者: chymanhz 时间: 2015-5-5 13:22
一个红光激发，一个蓝光激发，干扰很小才对啊

作者: niwanmao 时间: 2015-5-5 13:34
应该没问题的啊。

作者: culturelily 时间: 2015-5-5 18:53

niwanmao 发表于 2015-5-5 13:34
应该没问题的啊。

我在BD的虚拟补偿计算器上看到补偿超过100%了

作者: niwanmao 时间: 2015-5-6 08:45

culturelily 发表于 2015-5-5 18:53
我在BD的虚拟补偿计算器上看到补偿超过100%了

那个不准的。

作者: 水念人倦 时间: 2015-5-6 23:00
想请问一下。。如果两种染料用不同的激光器激发，然而发射光波长相近，那样干扰会很严重么？还是基本没有干扰呢？

作者: niwanmao 时间: 2015-5-7 08:38

水念人倦发表于 2015-5-6 23:00
想请问一下。。如果两种染料用不同的激光器激发，然而发射光波长相近，那样干扰会很严重么？还是基本没有干 ...

没有干扰或者非常小。

作者: 水念人倦 时间: 2015-5-7 14:52

niwanmao 发表于 2015-5-7 08:38
没有干扰或者非常小。

谢谢倪老师！！

作者: culturelily 时间: 2015-5-15 09:32

niwanmao 发表于 2015-5-7 08:38
没有干扰或者非常小。

这个问题我问过好几个流式的技术支持，回答不一样。有的说光谱接近的一定会有干扰

作者: niwanmao 时间: 2015-5-15 10:11

culturelily 发表于 2015-5-15 09:32
这个问题我问过好几个流式的技术支持，回答不一样。有的说光谱接近的一定会有干扰 ...

用了就知道：）

作者: chymanhz 时间: 2015-5-16 19:01

niwanmao 发表于 2015-5-15 10:11
用了就知道：）

这个和机器有关系，看厂家是否通过一些方法把它区分出来，比如FC500就不可以一起用，因为2个信号同时接收到一个通道了

作者: 小憨 时间: 2015-5-18 09:59
这两个没啥干扰，你说的干扰很大的可能是PE/Cy5和APC。

作者: 来瓶4/8血 时间: 2015-5-18 10:40

小憨发表于 2015-5-18 09:59
这两个没啥干扰，你说的干扰很大的可能是PE/Cy5和APC。

不同激光，发射光谱相同，接收通道不同就可以，接收通道一样就不行了。

作者: 小憨 时间: 2015-5-18 14:29

来瓶4/8血发表于 2015-5-18 10:40
不同激光，发射光谱相同，接收通道不同就可以，接收通道一样就不行了。 ...

发射光谱都相同了，能没干扰么……

作者: 来瓶4/8血 时间: 2015-5-18 16:06

小憨发表于 2015-5-18 14:29
发射光谱都相同了，能没干扰么……

不在一个接收通道就可以计算机标记出来

作者: hbezyr 时间: 2015-5-19 16:22

culturelily 发表于 2015-5-15 09:32
这个问题我问过好几个流式的技术支持，回答不一样。有的说光谱接近的一定会有干扰 ...

激光器不是同时来照到细胞的，有个激光延迟的。
只要是不同的激光激发，理论上没有相互干扰的可能，我个人感觉。

作者: culturelily 时间: 2015-5-20 08:22

hbezyr 发表于 2015-5-19 16:22
激光器不是同时来照到细胞的，有个激光延迟的。
只要是不同的激光激发，理论上没有相互干扰的可能，我个 ...

浙大下周有个流式培训，到时候去会上问问专家

作者: niwanmao 时间: 2015-5-20 11:15

culturelily 发表于 2015-5-20 08:22
浙大下周有个流式培训，到时候去会上问问专家

有什么好问的，我一直都是这么用的，用了10年了。BD的机器。

作者: qfzhang 时间: 2015-6-13 23:45

hbezyr 发表于 2015-5-19 16:22
激光器不是同时来照到细胞的，有个激光延迟的。
只要是不同的激光激发，理论上没有相互干扰的可能，我个 ...

即使激光延迟，但是发射的荧光就像灯泡一样向四面八方发射的呀，难道激光延迟的时候，相应的滤光片或者通道也是选择性的接受信号？

这个问题困扰良久，一直想不通。

作者: niwanmao 时间: 2015-6-14 12:33

qfzhang 发表于 2015-6-13 23:45
即使激光延迟，但是发射的荧光就像灯泡一样向四面八方发射的呀，难道激光延迟的时候，相应的滤光片或 ...

看看以前发的这篇帖子，你应该会有收获：http://www.flowcyto.cn/bbs/thread-3717-1-1.html

作者: qfzhang 时间: 2015-6-14 22:44

niwanmao 发表于 2015-6-14 12:33
看看以前发的这篇帖子，你应该会有收获：http://www.flowcyto.cn/bbs/thread-3717-1-1.html ...

非常感谢倪老师。仔细看了您推荐的帖子。有些明白了，虽然不是彻底明白。如果用不同激光器激发，那么根据斯托克位移的原理，长波长的荧光是不会漏到短波长的通道里面，但是短波长的荧光有可能会漏到长波长的通道里面。

也就是说，相比一根激光器激发，如果用两个激光激发的，补偿要小或者不需要补偿。

那个光路图还是看不懂。不管是什么激光器激发，只要发出一定波长范围的光，各个收集通道都会收集到相应的信号。还是不能彻底说明不同激光器激发，补偿小或者不用补偿。

作者: niwanmao 时间: 2015-6-15 09:00

qfzhang 发表于 2015-6-14 22:44
非常感谢倪老师。仔细看了您推荐的帖子。有些明白了，虽然不是彻底明白。如果用不同激光器激发，那么根据 ...

那个光路图每个小图对应的是一根激光器收集的光路，不同激光器之间原则上不会干涉，但实际上还是会稍微有一点点，具体原因我就不清楚了。

作者: 老猫 时间: 2021-12-15 05:27

hbezyr 发表于 2015-5-19 16:22
激光器不是同时来照到细胞的，有个激光延迟的。
只要是不同的激光激发，理论上没有相互干扰的可能，我个 ...

明白了，接收通道也是分时间段开通或关闭的，这样，不同激光器激发的，即使发射波长一样也能分辨开。

作者: 免疫小万 时间: 2022-10-20 10:58

niwanmao 发表于 2015-5-6 08:45
那个不准的。

老师请问percp-cy5.5和FITC是不是不推荐一起使用？

作者: niwanmao 时间: 2022-10-20 12:04

免疫小万发表于 2022-10-20 10:58
老师请问percp-cy5.5和FITC是不是不推荐一起使用？

没有问题，可以一起用

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