CD107a染色是否必须monensin？

yunshuizhixi

      最近在做CD107A 染色，我的处理方法是将T细胞与靶细胞共培养的同时加入CD107A抗体（BD公司），同时在培养体系中加入BFA（2ug/ml-10ug/ml），处理6-8小时后再标记CD3等抗原。但是结果与阴性对照（单独的T细胞）没有区别，因为我同时收上清检测细胞因子，所以可以确定T细胞受到刺激，而按照文献中介绍T细胞被刺激6小时后CD107A的表达会很明显。之前有怀疑过BFA的问题，但是有同事用相同的试剂和浓度处理PHA刺激的PBMC检测胞内细胞因子的表达结果很漂亮，所以可以排除BFA的问题。查阅了一些文献，大部分文献中都使用了monensin或者monensin和BFA同时作用，介绍说monensin可以调节溶酶体PH帮助CD107A与抗体的结合，所以我们重新订购了一批monensin但目前还没到货，同时最近BD公司的事情让我们也怀疑抗体的有效性，所以想问问有经验的朋友们，单独使用BFA作为分泌阻断剂能否染出CD107A？