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EB病毒 (EBV) 感染了全球90%以上的人口。儿童早期 EBV 感染常无症状，青少年和成人可发生传染性单核细胞增多症 (IM)，以发热、咽痛、淋巴结肿大和乏力为特征。对原发性 EBV 感染的免疫反应涉及 B 细胞、T细胞和自然杀伤 (NK) 细胞之间复杂的相互作用。
既往的研究已通过流式细胞术发现了IM 过程中的一些细胞变化，特别是CD8+ T细胞的增多。然而，随着流式细胞技术的进步，有必要进一步表征急性 EBV 感染的免疫学特征。
Singh P等人2024年6月3日的文章中利用流式细胞术较完整的挖掘了IM 期间外周血白细胞群的新改变，尤其是淋巴细胞亚群、单核细胞和粒细胞，从而得出急性EBV感染会诱导多个白细胞亚群的激活，而不仅仅是细胞毒性T细胞，为理解IM免疫生物学提供了新的观点。
设门策略和分析
1.淋巴细胞：基于 CD45/SSC设门
- B 细胞：在 CD19/SSC进一步设门
- 细胞毒性 T 细胞：CD8bright/SSC设门
- 大颗粒T淋巴细胞 (T-LGL)：CD45bright +/CD19-/CD5dim +
2.单核细胞：CD45/SSC设门，并且CD14阳性
3.粒细胞：CD45/SSC设门，并圈CD13 阳性
具体分析包括：
- CD8 + T细胞活化：HLA-DR/CD38共表达
- T-LGL样细胞：CD4/CD8比值和 CD11b 表达
- 单核细胞亚群：CD14/CD16表达
- 粒细胞活化：CD64表达
结果
见下表
淋巴细胞亚群
1、T细胞：
- IM中CD3+ T细胞增多 (83%vs 66.6%，p < 0.0001)
- IM中CD8+ T细胞显著增多 (55.5%vs 27.6%，p < 0.0001)
- IM组CD4/CD8比值倒置 (0.5 vs 1.7，p < 0.0001)
2、B细胞：
- IM中CD19+ B细胞显著减少 (6%vs 18.8%，p < 0.0001)
3、NK细胞：
- IM和对照组间CD56+ CD16+ NK细胞无显著差异
4、T细胞活化：
- IM中HLA-DR+ 淋巴细胞增加 (55.6%vs 21.6%，p < 0.0001)
- IM患者淋巴细胞上HLA-DR+ CD38+ 的共表达率更高 (54%vs 16.8%，p < 0.0001)
- 在10色分析中，CD8+ T细胞在 IM 中显示出明显更高的HLA-DR+ CD38+ 共表达 (72.2%vs 15.6%，p = 0.001)
5.T-LGL样细胞：
- IM中的T-LGL样细胞明显增高 (23.7%vs 10.7%，p = 0.0004)，主要为CD8+（81.5%vs对照组51.7%，p = 0.001）
- 有趣的是，IM中的T-LGL 显示活化标志物CD11b的低表达（T-LGL中CD8+ CD11b-部分：IM中 71%vs 对照组中28.5%，p = 0.001）
单核细胞亚群
- IM 中CD16+ 单核细胞增加 (25.8%vs 14.7%，p = 0.0074)，即“中间型”或“非经典型”单核细胞
粒细胞活化
- IM 中CD64 + 中性粒细胞明显增多 (64.2%vs 14.4%，p < 0.0001)
对单因素分析中显示差异有统计学意义的4个变量：淋巴细胞CD4/CD8比值、CD19+细胞比例、T-LGL群体比例、粒细胞CD64表达率，进行多元logistic 回归分析。有趣的是，当控制了其他因素时，只有CD19+细胞比例（即B细胞含量）始终是 IM 诊断的可靠预测因子 (OR = 0.729；CI = 0.537-0.991；p = 0.044)。
在IM初次诊断后一个月进行随访流式细胞术的2例病例中，研究人员观察到一些参数恢复正常：
- B细胞比例恢复
- 活化的细胞毒T细胞减少
- CD16+ 中间/非经典单核细胞减少
- CD64+ 中性粒细胞几乎完全消失。
这些发现提示这些指标是 EBV 感染急性期的特异性反应，这些免疫反应的消失或降低，证明感染得到了控制。
参考文献：Singh P, Gadgeel M, AlQanber B, Farooqi A, Savaşan S. Flow Cytometry as the Tool to Define Peripheral Blood Leukocyte Signatures in Acute EBV Infection. Cells. 2024;13(11):963. Published 2024 Jun 3. doi:10.3390/cells13110963
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