全血提取淋巴细胞存放过程中的变化

cccssszzz08

最近做了个试验。全血用淋巴细胞提取试剂盒提取固定，存放不同时间后利用流式检测。同一样本随着时间的延长，在FCS-SSC散点图中出现了一团新的物质，而且越来越多。请问这是什么呢？
这样的话，那我提取的淋巴细胞是否还能用呢？

stf1990

淋巴细胞的比例看起来变化不大，请问楼主是如何储存的，用的何种储存液？是在－80摄氏度条件下吗

cccssszzz08

stf1990 发表于 2019-6-28 17:15
淋巴细胞的比例看起来变化不大，请问楼主是如何储存的，用的何种储存液？是在－80摄氏度条件下吗 ...

室温保存的。
看左下角细胞碎片的比例随时间较少，右上角不明物质在增多。是否是碎片团聚呢？

niwanmao

咦，奇怪，粒细胞怎么会无中生有？

cccssszzz08

niwanmao 发表于 2019-6-29 11:57
咦，奇怪，粒细胞怎么会无中生有？

倪老师好，好久不见啊。从第一次注册，时隔6年，我又回来啦。
对于所提出的问题，补充一下。是抽取了人全血，在采血管中室温保存。存放不同时间后用淋巴细胞提取试剂盒提取淋巴细胞，结果就是上面那样的结果。
我也没搞清是什么原因。。。您有什么高见吗？

cccssszzz08

niwanmao 发表于 2019-6-29 11:57
咦，奇怪，粒细胞怎么会无中生有？

您看一下左下角随便的部分一直在减少，而您说的粒细胞的部分一直在增加。所谓的粒细胞是否有可能是碎片团聚造成的呢？

niwanmao

cccssszzz08 发表于 2019-6-30 11:01
您看一下左下角随便的部分一直在减少，而您说的粒细胞的部分一直在增加。所谓的粒细胞是否有可能是碎片团 ...

粘连不应该这么规则的，获取前后，有没有上过其它含粒细胞的样本？

路缀轻

cccssszzz08 发表于 2019-6-30 11:00
倪老师好，好久不见啊。从第一次注册，时隔6年，我又回来啦。
对于所提出的问题，补充一下。是抽取了人全 ...

全血样本离开人体后，随着时间延长，粒细胞会活化从而降低密度。如果是使用密度梯度离心法分离淋巴细胞的话，粒细胞会混合在淋巴细胞层（即白膜层），因此不能去掉粒细胞了。你的这个实验，开始没有粒细胞，后面的就出现了粒细胞，可能与这个血样放置时间过久有关。

cccssszzz08

niwanmao 发表于 2019-6-30 22:43
粘连不应该这么规则的，获取前后，有没有上过其它含粒细胞的样本？

上的样品都是全血提取淋巴细胞的样本，应该是会有粒细胞的吧。

niwanmao

cccssszzz08 发表于 2019-7-1 14:01
上的样品都是全血提取淋巴细胞的样本，应该是会有粒细胞的吧。

会有，后来应该是粒细胞死的快。
但你这里新鲜的时候反而是没看到，在后面越来越多，这就解释不通了。
下次再试一次看看，同时标记淋巴和粒特异性标记看看，我觉得不应该啊