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悬赏2流星未解决
小弟我现在正好在做血小板活化的流式,有几个问题想咨询下坛里的各位。
我用的是最常见的BD的血小板活化的Protocol https://www.bdbiosciences.com/en ... platelet-activation
主要是三种颜色:FITC PAC-1; PE CD62P ; APC CD61。 用CD61圈血小板门后,看门内PAC-1和CD62p的阳性情况
问题:由于我做的是不对血小板进行额外刺激的检测,对比患者和健康人血小板活化的差异,因此CD62p的阳性率本来就不是很高,不会像用ADP刺激后那么明显。然后现在的问题就是PE IgG(使用的是CD62p说明书上推荐的货号)的同型对照总是比CD62p的阳性率更高,即使在IgG只加一半量的情况下也是如此(我按照说明书都是各加20ul)。
我之前看了论坛里的文章,包括我们实验室做别的细胞的也有许多人有类似问题。另外看到倪老师之前有发文章讲到同型对照的不可靠。因此我想问一下,在加FC block的前提下,可否不实用同型对照,而使用FMO对照(即CD61 APC+ PAFC-1 FITC)作为PE CD62p的阴性对照呢?
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