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悬赏1流星未解决
主要就是使用CFSE染色PBMC然后流式检测增值峰,目前的问题是我们用CFSE染色,大部分时候会染色失败,我们将染色的PBMC和未染色的PBMC检测,发现FITC通道荧光信号几乎没什么差别,目前还没找出原因。 我们将染色的PBMC和未染色的PBMC检测,发现FITC通道荧光信号几乎没什么差别
具体操作步骤如下:
取密度梯度离心法分离的PBMC,生理盐水洗涤3次。
使用PBS将CFSE母液调整之终浓度0.2uM和2uM,并用此溶液调整BMC浓度至1*10^7/ml
37℃避光孵育15min
方入5倍体积的预冷的完全培养基(10%FBS),放入4℃冰箱孵育10min
孵育完成后取出直接离心取上清,再用生理盐水洗涤2次
生理盐水重悬送流式检测
不知道那个环节出问了,总是染不上,求解答
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