小鼠巨噬、DC、单核、中性粒如何设门？以肺组织为例

niwanmao

用流式如何分出小鼠肺组织中的不同细胞类型呢？

方案，要复杂可以很复杂，但要简单，也可以只用F4/80、CD11b、CD11c 和 GR-1来区分不同细胞类型。

小鼠肺组织经过dispase酶消化后，用荧光标记的F4/80、CD11b、CD11c 和 GR-1抗体染色。

下图中(A, B) F4/80+ 、CD11b low 、CD11c+是肺泡巨噬细胞，而 F4/80+ CD11b high CD11c low被分为CD11bhigh 巨噬细胞。 (C) F4/80-/low CD11c high 是DCs，并可细分为 CD11b low/mid DCs 和 CD11b high DCs。 F4/80low CD11c low CD11b mid  是单核细胞。 (D) F4/80low CD11c low CD11b high GR-1 high是中性粒细胞。




下表是各类细胞的表型总结：

细胞类型	表型	C57BL/6小鼠参考值％
肺泡巨噬细胞	F4/80high CD11blow CD11chigh GR-1low FShigh SShigh	3.66 ± 2.25
CD11b high巨噬细胞	F4/80high CD11bhigh CD11cvar GR-1low FSvar SSvar	7.90 ± 6.97
CD11b low/mid DC	F4/80low CD11blow/mid CD11chigh GR-1low FSmid SSmid	3.72 ± 1.29
CD11b high DC	F4/80low CD11bhigh CD11chigh GR-1low FSlow/mid SSlow/mid	10.80 ± 4.42
单核细胞	F4/80low CD11bmid CD11clow/mid GR-1low/mid FSlow SSlow	16.03 ± 6.78
中性粒细胞	F4/80low CD11bhigh CD11clow GR-1high FSvar SSvar	34.81 ± 13.44
ATII上皮细胞	LBP18high FSmid SShigh (low for other markers)	13.11 ± 3.46

信源：Hall JD, Woolard MD, Gunn BM, et al. Infected-host-cell repertoire and cellular response in the lung following inhalation of Francisella tularensis Schu S4, LVS, or U112. Infect Immun. 2008;76(12):5843-5852. doi:10.1128/IAI.01176-08

18804313936

倪老师您好！那么请问如果想要准确圈出BALb/c小鼠肺组织Lin（CD3，CD4，CD8a，CD11b，CD11c，CD19，CD49b，Ter119，Ly-6G/Ly-6C）阴性细胞，需要单独借鉴上述每一种抗体的分群嘛？有什么更好的方法嘛？谢谢！

niwanmao

18804313936 发表于 2022-8-17 09:45
倪老师您好！那么请问如果想要准确圈出BALb/c小鼠肺组织Lin（CD3，CD4，CD8a，CD11b，CD11c，CD19，CD49b， ...

如果这些系列特异性抗体用于排除性设门，只需一个通道即可，不用参照上面这么复杂设门。