|
悬赏1流星未解决
各位老师,大家好,我最近开始学习用流式检测凋亡
试剂盒:BD #559763 (PE-Annexin和7AAD标记)
细胞:原代大鼠心肌细胞 ,贴壁
步骤:1.用过氧化氢H2O2刺激细胞;
2. 不含EDTA胰酶消化细胞,离心,弃上清;
3. 加含FBS血清的培养基放培养箱中培养30min; (这一步是看网上朋友说,这样可以一定程度修复机械损伤细胞)
4. 离心,弃上清培养基,加试剂盒里面的binding buffer, 根据分组,加5ulPE,5ul 7-AAD;
5. 室温孵育20min,上机(贝克曼仪器)
通道:横坐标用的FL2-PE,纵坐标用的FL3-PC5.5
学生分析结果后,遇到如下问题 :
1. PE单染右下角拖尾很奇怪,不知道是不是我补偿调节有问题呢?
2. 双染的3组,Q3象限细胞拖尾,这是我分析的问题吗? 还是样本或者试剂问题?
谢谢各位老师
|
|