新人求助人外周血单核细胞亚群比例分析

xiaoxiao0217

我做的是人外周血单核细胞亚群比例的分析，现在遇到了如下两个问题：
1.CD45分两群（图1）：我用的是健康人离体4h内的新鲜外周血100ul，CD45抗体加了1ul，做了好几次都有这个问题
2.单核亚群分群不佳（图2）
本人流式菜鸟，请各位大神指点一下可能是哪里出了问题，谢谢！

niwanmao

抗体用量上面，先不要这么节省，先根据说明书，用全量。

xiaoxiao0217

好的，谢谢倪老师，我也考虑是不是这个问题

xiaoxiao0217

谢谢倪老师！我用了2ul和5ul的抗体（分别是1.1、2.1和1.2、2.2），结果好了很多

niwanmao

xiaoxiao0217 发表于 2022-8-18 21:49
谢谢倪老师！我用了2ul和5ul的抗体（分别是1.1、2.1和1.2、2.2），结果好了很多 ...

5ul的就完全不同了，说明前面就是因为抗体量不足导致最后染色没染充分，部分细胞荧光强度弱。