临床外周血样本单核细胞亚群圈门求助

xiaoxiao0217

求助各位前辈老师！我想检测患者外周血中单核细胞亚群的比例，设门逻辑参考了论坛中的这一篇（全血免疫细胞检测标准化，可参考这篇
https://flowcyto.cn/bbs/thread-10023-1-1.html(出处: 流式中文网)），在最后一步的亚群圈门上出现了问题。由于我做的60+例患者外周血样本中单核细胞的CD14表达都不高，所以我基本是根据CD16的差异性表达分出的三类亚群。但正是由于CD14的表达强度低，如果用矩形门直接圈感觉误差会比较大，所以我现在是根据流式图中的细胞分群、用不规则多边形圈门（图1），但又担心这一种圈门方法不被大众所认可，因此想请教一下这种情况下如何圈门比较合理？
另附上同一患者ungated SSC/CD14（图2）、另一做了CD14FMO的患者外周血单核细胞CD14/CD16图像（图3）和参考文献中的圈门逻辑（图4）。

niwanmao

这种设门方法逻辑上还是讲得通的，不过最好能够再加上排除T、B、NK、DC、嗜碱粒细胞的系列标记，会使得单核亚群比例更准确。

xiaoxiao0217

好的，我以后会更加注意，谢谢倪老师！