同型对照的问题

leidengfox

我是测细胞表面CD14、TLR2、TLR4，用的是平均荧光强度，发现同型对照3次上机差别有点大 而且有时候实验组比同型还低，我测的3个因子在正常的细胞没有表达，是不是可以不用考虑同型对照，如果没有同型对照我的实验组的结果相比阴性组还可以，但是这样是不是不行，请老师帮助

niwanmao

如果正常细胞肯定不表达，是可以只用正常细胞做阴性对照，而同型对照可以省略掉。

leidengfox

我想问  那用了同型是不是也没关系 到时候统计的时候略去呢？还有我发现流式几次上机的重复性不是很好，这是什么原因

niwanmao

leidengfox 发表于 2011-9-1 19:38

                               
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我想问  那用了同型是不是也没关系 到时候统计的时候略去呢？还有我发现流式几次上机的重复性不是很好，这 ...

实验样本的荧光比同型对照的荧光还低，我在帮研究生测的时候碰到过几次，我估计可能性有：
1、同型对照未选择正确，应选择亚型相同，最好是抗体说明书上推荐的同公司生产的。
2、该同型的非特异性结合能力强。这时，只能选择阴性对照来做。
既然没有用，你就不做呗，为什么一定要做了，浪费钱，然后统计的时候不用。