有关检测细胞调亡的小问题

llhlz1971 · 发表于 2011-9-7 22:28:16

我想用Annexin V 单染检测细胞早期调亡,不知能否用1%的多聚甲醛固定后,48h内上机检测?我看了大部分操作步骤都不主张用甲醛固定,但有人认为可用甲醛固定,不过上机前再用PBS洗一遍即可.因此,想请高手解释一下.

niwanmao · 发表于 2011-9-7 22:28:17

llhlz1971 发表于 2011-9-8 08:12

登录/注册后可看大图

倪老师:
我是说在annexin v染色之后再固定,而不是染色之前的固定.

也不建议。因为ANNEXIN V的不稳定性。

niwanmao · 发表于 2011-9-8 06:53:19

从检测原理上讲是不允许固定的，而且必须要新鲜做。因为annexin v外翻至膜表面，不是一个稳定的事件，如果多聚甲醛一固定，更不容易结合了。

llhlz1971 · 发表于 2011-9-8 08:12:22

倪老师:
我是说在annexin v染色之后再固定,而不是染色之前的固定.

llhlz1971 · 发表于 2011-9-8 14:10:16

谢谢倪老师!!

wengxiangqin · 发表于 2011-9-8 14:21:53

用annexin v 测凋亡是不可以固定的，倒不是因为它是否稳定，而是固定会导致细胞膜通透性增加，从而让annexin v进入胞浆，导致所有细胞均annexin v阳性，无法辨别真正的凋亡。请关注ANNexin v染色测凋亡的原理：PS外翻，与annexin v结合，从而确定细胞凋亡。

niwanmao · 发表于 2011-9-8 15:12:02

wengxiangqin 发表于 2011-9-8 14:21

登录/注册后可看大图

用annexin v 测凋亡是不可以固定的，倒不是因为它是否稳定，而是固定会导致细胞膜通透性增加，从而让annexi ...

嗯，正解，是我想错了。我看看能否把这个帖子的最佳答案改回来。

niwanmao · 发表于 2011-9-8 15:20:17

我在本帖2楼对于 ANNEXIN V染色不能用多聚甲醛固定的原因理解错误，正确答案应是6楼wengxiangqin同学所说。但由于最佳答案llhlz1971已经确定掉了。所以我只能给wengxiangqin同学转移5颗流星。

账号		自动登录	找回密码
密码			加入流式中文网

[凋亡检测] 有关检测细胞调亡的小问题