JC-1为什么中间有一群细胞明显的密度高呢？

AIRYY

niwanmao

JC-1染色，你这里的FITC单染和PI单染是做什么用？JC-1本身就是通过红光和绿光的强度变化来判断线粒体膜电位变化的。
另外，CCCP似乎没出现明显的变化，似乎有点说不过去。药物倒是可看到明显的分群变化，但是中间出现这么一群死细胞性质的，有点奇怪。

Flowjo的补偿调节，是需要复制一个Matrix后再调的。

AIRYY

niwanmao 发表于 2023-8-8 22:08
JC-1染色，你这里的FITC单染和PI单染是做什么用？JC-1本身就是通过红光和绿光的强度变化来判断线粒体膜电位 ...

感谢倪老师解惑。我之前理解的是JC-1聚合体发红光，JC-1单体发绿光，相当于双染（有些像流式检测凋亡FITC/PI），以为调补偿需要单染管补偿。
中间的一群细胞是因为我圈门的时候把两群细胞都圈进去了吗。中间的一群细胞是凋亡晚期的细胞或者死亡细胞？
复制Matrix后可以调补偿了。
谢谢倪老师。

niwanmao

AIRYY 发表于 2023-8-9 11:09
感谢倪老师解惑。我之前理解的是JC-1聚合体发红光，JC-1单体发绿光，相当于双染（有些像流式检测凋亡FITC ...

中间这群不太正常，所以更倾向于死细胞的非特异性荧光。

AIRYY

niwanmao 发表于 2023-8-9 21:01
中间这群不太正常，所以更倾向于死细胞的非特异性荧光。

谢谢倪老师的解答。