人全血MDSC的圈门问题

刚刚刚

样本为：人全血，破红处理

抗体为：CD33-FITC \ CD14-PE \ CD11b-PE-cy7 \ HLA-DR-APC
1. 想请教下根据这个抗体组合该如何正确的圈出MDSC细胞的表达，或者需要增加什么marker的抗体，十分感谢！！
2. 之前实验室的MDSC圈门策略很奇怪，我一直没看懂逻辑是什么，如果有懂的老师可以教我一下，十分感谢！

附件压缩包：BD Verse 机器收集的上述mdsc染色原始数据
附件图片：原实验室圈门策略

niwanmao

如果你用的是同一个方案，就参考他们的逻辑即可，各图分别是：
1、P3是碎片
2、排除掉碎片，圈SSC中等到小，CD14表达强度不限的细胞（其实这个图直接圈CD14+的即可）。
3、圈CD33+CD14+的单核细胞
4、在单核细胞中，分析CD11b+而HLA-DR阴性的单核MDSC。

刚刚刚

niwanmao 发表于 2023-10-10 15:30
如果你用的是同一个方案，就参考他们的逻辑即可，各图分别是：
1、圈P3淋巴细胞门
2、排除掉淋巴细胞，圈SS ...

第1图：我问了师兄，p3圈群应该为细胞碎片群，p3是除去了细胞碎片，
第2图：所以图二的三群应该为：中性粒、淋系和单核，考虑到单核细胞强表达cd14，所以从左往右我觉得应该为淋系（左下）中性粒（中上）单核（右），圈群圈到了淋系和单核群
第3图：在淋系和单核中圈CD33+CD14+的单核细胞
第4图：看CD11b+而HLA-DR阴性的细胞群占CD33+CD14+的单核细胞的比例

这样的圈群逻辑去圈MDSCs细胞真的没问题吗？例图是一个正常人血样的检测结果，mdscs的表达为1.2%，其他的人的做出来的经常有高达百分之四五十的，而老师给我的正常人的标准要低于0.5%

niwanmao

刚刚刚 发表于 2023-10-10 18:01
第1图：我问了师兄，p3圈群应该为细胞碎片群，p3是除去了细胞碎片，
第2图：所以图二的三群应该为：中性粒 ...

对，P3是碎片，我前面说错了。

比例没问题，前面这个图并不是1.2，你标识的1.2是去掉中性粒细胞的（包括了淋巴和单核），而你导师说的应该是占总的白细胞吧，那样的话，1.2需要再乘以20.9％=0.25％

刚刚刚

niwanmao 发表于 2023-10-11 08:08
对，P3是碎片，我前面说错了。

比例没问题，前面这个图并不是1.2，你标识的1.2是去掉中性粒细胞的（包括 ...

嗯嗯，明白了，原来如此！多谢倪老师！！