线粒体膜电位JC-1

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大家好，我是流式小白，这是我的第一个流式实验。结果分群特别差，我看了很多站内很多JC-1相关的帖子，补偿也调试过分不开（可能是我不会调）。 实验目的：测线粒体膜电位，买的碧云天的JC-1试剂盒，按照说明书操作。 请求老师们解惑： 1、结果不好的原因，是不是FSC和SSC电压没调好，PE和FITC是因为补偿没调好吗？ 2.  我的测试是不是失败了？ 空白组：                                 登录/注册后可看大图 CCCP阳性组：                                 登录/注册后可看大图 阴性组：                                 登录/注册后可看大图

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图片被吃了？我重新发一下

范晋波

FSC和SSC条件需要调节，而且细胞状态确实不太好~

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范晋波 发表于 2023-10-31 11:43
FSC和SSC条件需要调节，而且细胞状态确实不太好~

感谢老师回复！是细胞本身线粒体膜电位就很低的缘故吗？然后我分群这么差劲的原因还有可能是因为啥？

范晋波

13450328474 发表于 2023-10-31 12:02
感谢老师回复！是细胞本身线粒体膜电位就很低的缘故吗？然后我分群这么差劲的原因还有可能是因为啥？ ...

应该就是细胞质量的问题，做个正常组的，排除一下实验处理造成的影响~

范晋波

13450328474 发表于 2023-10-31 12:02
感谢老师回复！是细胞本身线粒体膜电位就很低的缘故吗？然后我分群这么差劲的原因还有可能是因为啥？ ...

阈值也可以小一点，有些细胞都被切掉了

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范晋波 发表于 2023-10-31 12:13
阈值也可以小一点，有些细胞都被切掉了

好的，谢谢老师

13450328474

范晋波 发表于 2023-10-31 12:13
阈值也可以小一点，有些细胞都被切掉了

样本是新鲜的，有没有可能是试剂的问题或者实验操作的问题。试剂是在4℃误放保存了半年的JC-1，说明书说-20℃保存

范晋波

13450328474 发表于 2023-10-31 13:28
样本是新鲜的，有没有可能是试剂的问题或者实验操作的问题。试剂是在4℃误放保存了半年的JC-1，说明书说- ...

有这个可能，如果探针失效，这种图像也可以解释