baseline状态下G2/M期占比较文献中偏高

WZNan

倪老师好，各位老师、同道好
最近在做小鼠原代肾小管上皮细胞的细胞周期实验
发现在没有任何处理的baseline状态下G2/M期占比比文献中高很多，文献中多为10-15，我做出来一般是25左右
以下是我的分析流程，想麻烦各位老师看看过程中有没有问题
我使用的试剂是BD的PI/RNase staining buffer，货号550825，固定方法为75%乙醇4度固定过夜
以及想请问各位老师，G2/M期的占比会和胰酶消化、增殖旺盛、转染或慢病毒转染有关吗，谢谢！

niwanmao

多次重复结果均如何吗？
看图形还是挺好的嘛

wxd

G2/M的比例确实可能会和增殖旺盛、转染或慢病毒转染有关。和胰酶消化关系不太大，胰酶消化不好只会导致细胞完整性出问题。至于你说的G2/M期比例和文献相比差异过大，可能是细胞来源、血清分级、培养基差异、传代次数等差异导致的，无需过于担心，科研实验的重点在于不同组别之间的变化趋势。

WZNan

niwanmao 发表于 2023-11-6 21:59
多次重复结果均如何吗？
看图形还是挺好的嘛

是的倪老师，多次重复均如此

WZNan

wxd 发表于 2023-11-7 09:20
G2/M的比例确实可能会和增殖旺盛、转染或慢病毒转染有关。和胰酶消化关系不太大，胰酶消化不好只会导致细胞 ...

嗯嗯，谢谢回复，我怕是处理or分析过程有问题，导致结果不真实或者不可靠