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[其它] 关于原代骨髓细胞敲除特定基因后及进行骨髓移植的问题

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发表于 2023-11-16 16:43:54 | 显示全部楼层 |阅读模式
悬赏30流星未解决
求助各位老师,最近需要做一个小鼠骨髓重建的实验,想在体外敲除骨髓细胞的某个基因,随后通过尾静脉注射移植到辐照小鼠体内,骨髓重建后再进行造模,以验证该基因的作用。若有该基因的敲除鼠的话直接提取骨髓细胞即可,但是从头开始构建基因敲除鼠所花费的时间过长,所以在寻求其他办法,比如提取细胞后在体外进行敲除再移植。目前已经试过ShRNA的方法,但是失败了。希望有这方面经验的老师能够指点一下。

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发表于 2023-11-17 07:52:11 | 显示全部楼层
shRNA存在蛮大不确定性,为什么不用现成的CRISPR商品化方案呢?

例如目前能搜到的https://www.synthego.com/products/crispr-kits/gene-knockout-kit,还有被丹纳赫收购的IDT(https://sg.idtdna.com/pages/applications/gene-knockout
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