求助！带有GFP的细胞如何检测ROS？

刘小六

本来计划的实验是用DCFH-DA探针检测ROS，走FITC通道。猛然想起来自己的实验组KD是带有GFP的稳转株，这样的话我就不能用现有的试剂盒（DCFH-DA）做了。请问各位老师们有遇到和我一样的情况吗？那我可以用DHE探针（红色）来检测吗？绿色荧光的激发峰是475左右，红色荧光是488-535，绿色的发射峰是509，红色的发射峰是610，请问上流式检测有合适的通道吗?会不会出现绿色荧光干扰红色荧光的结果

sunny2829

Dihydroethidium (DHE)可以的，Excitation/Emission 518/606 nm，对应检测通道488激光下的PE通道，GFP对DHE有荧光溢漏，需要调节补偿。
也可以选择 CellROX Deep Red，Excitation/Emission，644/665 nm，对应检测APC。

刘小六

sunny2829 发表于 2024-2-21 11:14
Dihydroethidium (DHE)可以的，Excitation/Emission 518/606 nm，对应检测通道488激光下的PE通道，GFP对DHE ...

感谢！！太感谢啦！