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[淋巴细胞亚群] 血液mnc细胞流式请教,isotpye阳性群,淋巴群旁边的奇怪细胞群

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发表于 2024-4-25 22:40:57 | 显示全部楼层 |阅读模式
悬赏1流星已解决

实验为研究健康人外周血treg细胞,流式细胞仪为bd calibur, 四色panel(FITC,PE,PECY7,APC).现遇到奇怪的结果,已经在5个样本中出现,诚恳请教前辈们!

问题:1)图一标识1所指的群是什么细胞?这个群在isotype和染色的管子里都有出现,可见图二的单染管(图二红圈标识),这个是粒细胞吗?粒细胞不是用ficoll去掉了吗,为什么还会出现?

2)isotype边缘有一条阳性群线(图一标识2),这个是杂质还是电压设置问题?怎么能保证背景干净?

3)PE-cy7的isotype有阳性群(图一标识3),这个是非特异染色吗?我已使用全新的isoPE-cy7抗体,确保抗体没被污染,但这个群仍有出现,查阅文献抗体可能是fc段特意染色,但仍不确认,请前辈赐教!

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箭头1的右侧那些是中性粒细胞,即使 Ficoll提取,也会有中性粒的。 图1的1、2、3以及图2这些所指区域,总体来说,还是跟管路不干净相关性更大
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发表于 2024-4-25 22:40:58 | 显示全部楼层
箭头1的右侧那些是中性粒细胞,即使 Ficoll提取,也会有中性粒的。

图1的1、2、3以及图2这些所指区域,总体来说,还是跟管路不干净相关性更大
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 楼主| 发表于 2024-4-26 17:32:52 | 显示全部楼层
niwanmao 发表于 2024-4-26 09:30
箭头1的右侧那些是中性粒细胞,即使 Ficoll提取,也会有中性粒的。

图1的1、2、3以及图2这些所指区域,总 ...

感谢倪老师指教!我会清洗管道再试一下
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