细胞实验未染死活的空白组细胞出现分群

aoliviay

请教各位老师，空白组细胞构成为一半对照组加一半处理组细胞，未行zombie NIR死活染色，但流式检测时出现分群现象；而染死活的对照组及处理组均未分群，用不同细胞系，不同流式仪器（BD、BECKMAN）都是一样的结果，请问还有什么原因呢？下图从左到右依次为空白组，对照组，处理组死活染色流式图。

niwanmao

因为你用对照组和处理组混合，所以势必形成两个大小不同的群体，如果你把对照组和处理组的数据叠加在一起，也是类似的两个群体。

aoliviay

niwanmao 发表于 2024-5-11 09:10
因为你用对照组和处理组混合，所以势必形成两个大小不同的群体，如果你把对照组和处理组的数据叠加在一起， ...

以前做别的处理时，空白组都是这样的细胞构成，不太会分群；那请问空白组怎么设置呢？

niwanmao

aoliviay 发表于 2024-5-11 16:32
以前做别的处理时，空白组都是这样的细胞构成，不太会分群；那请问空白组怎么设置呢？ ...

因为不太清楚你设置这个组的目的是什么，所以不好回答。但实际上，如果你是为了设置某标记的阴性对照，应该用处理组的FMO+FcBlock作为参照

aoliviay

niwanmao 发表于 2024-5-11 19:01
因为不太清楚你设置这个组的目的是什么，所以不好回答。但实际上，如果你是为了设置某标记的阴性对照，应 ...

好的，非常感谢！

AndyCheung

空白组细胞构成为一半对照组加一半处理组细胞。。。这是什么奇怪的构成

aoliviay

niwanmao 发表于 2024-5-11 09:10
因为你用对照组和处理组混合，所以势必形成两个大小不同的群体，如果你把对照组和处理组的数据叠加在一起， ...

老师我还想问一下，我用流式做药物的IC50，各个浓度染了死活染料之后如上图第2张，对照组（0）存活率才16%，药物处理组细胞存活率几乎没有，细胞群体整体右移，重复好几次都是如此，请问是操作有问题吗？但做别的药物流式不会出现这种情况

niwanmao

aoliviay 发表于 2024-6-3 15:00
老师我还想问一下，我用流式做药物的IC50，各个浓度染了死活染料之后如上图第2张，对照组（0）存活率才16 ...

这个药物是不是太强了，减少用量，做个梯度看看