经常所说的互斥表达的marker有哪些？光谱流式死活染料问题

Veblen

请问两个问题：

1. 经常会说到一些互斥表达的marker，只知道CD4/CD8, 除了这两个常见的还有哪些呢？
2. 为什么光谱流式死活染料做单染，活细胞（左边那一群）要保证与blank里的荧光大小差不呢？
而其他指标的单染却没有这么严格的要求呢（即阴性群要与Blank管细胞荧光要接近）？

恳请老师回答一下上面的问题，谢谢啦。

niwanmao

1、互斥也只是特定条件下，在大多数情况下两者不会出现在同一群细胞上，像4、8正常本身就有一些双阳性群体，严格说不算互斥，只是单阳性群体的分群比较好看。    正常样本应用的时候，T、B、髓，只要这个标记不表达在其它系列，两两之间就可以算互斥。

2、如果要做的好，荧光流式其实也要求，光谱流式做死活染料滴定使背景降到和blank一致，也是为了准确解析

Veblen

niwanmao 发表于 2024-6-22 11:16
1、互斥也只是特定条件下，在大多数情况下两者不会出现在同一群细胞上，像4、8正常本身就有一些双阳性群体 ...

谢谢老师，明白了。还想追问一个问题，做光谱流式时通过单染得到标准光谱曲线，这个曲线是如何得到的呢？（我知道是根据每一个检测器所检测到的荧光信号而来，我想知道具体是怎样根据这些荧光信号得到的曲线）

niwanmao

Veblen 发表于 2024-6-22 16:25
谢谢老师，明白了。还想追问一个问题，做光谱流式时通过单染得到标准光谱曲线，这个曲线是如何得到的呢？ ...

光谱流式单染光谱数字化解析下图所示（见Mathematics of spectral unmixing │Peter Mage │ Babraham Institute Spectral Symposium 2022 - YouTube），大致原理是仪器获得每个信号在各通道的数字化信号，用横坐标表示各通道，就形成一条彩虹色的类似于曲线的光谱特征，这些特征可以数字化形成一个矩阵，这些单染矩阵R和最终的混合染料矩阵m之间，有个线性几何解a，R*a=m。这个解a就是类似于常规流式的补偿矩阵。