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[仪器维护] 贝克曼荧光泄露问题

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发表于 2024-7-11 10:15:13 | 显示全部楼层 |阅读模式
悬赏6流星未解决
如题,我们最近发现我们的APC和FITC均会溢漏到PC5.5通道,按理论来说这两个染料完全不会溢漏到PC5.5通道的,感觉很奇怪,目前已排除仪器残留问题。

清洗前空白管

清洗前空白管

清洗前CD19-AF647

清洗前CD19-AF647

清洗前CD8-APC

清洗前CD8-APC

清洗前CD3-FITC

清洗前CD3-FITC

清洗后CD45R-APC

清洗后CD45R-APC
流式中文网FlowGuard®流式专用保存液,无需冻存,稳定保护各类流式样本,从容完成实验
发表于 2024-7-11 10:21:35 | 显示全部楼层
你可以把所有通道两两组合散点图放出来观察一下,究竟是哪个通道漏过去的,另外Time参数图也放出来
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发表于 2024-7-11 13:07:39 | 显示全部楼层
用过贝克曼的cytoflex,fitc染料的荧光确实会渗漏到pc5.5通道
组织样本处理不好?流式中文网原研的魔滤®魔杵®套装,低成本解决,高质量收获
 楼主| 发表于 2024-7-11 13:53:29 | 显示全部楼层
其他散点图如下
APC-FITC.png
APC-PC5.5.png
APC-PE.png
FITC-PC5.5.png
FITC-PE.png
PE-PC5.5.png
Tim轴.png
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发表于 2024-7-12 09:06:00 | 显示全部楼层
现在串联荧光染料在不同通道内也会存在荧光溢漏的现象,BD的机器上PE-cy7和apc-cy7就存在荧光溢漏。只有用补偿来解决这个问题。
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 楼主| 发表于 2024-7-12 09:41:02 | 显示全部楼层
congou 发表于 2024-7-12 09:06
现在串联荧光染料在不同通道内也会存在荧光溢漏的现象,BD的机器上PE-cy7和apc-cy7就存在荧光溢漏。只有用 ...

我这个是APC和FITC,这两个都不是串联染料
组织样本处理不好?流式中文网原研的魔滤®魔杵®套装,低成本解决,高质量收获
 楼主| 发表于 2024-7-15 14:48:42 | 显示全部楼层
按贝克曼应用工程师解释,APC在488有约1%的激发,又因为488激发功率较高,因此会在PC5.5通道有弱阳性信号,另外AF647的结果似乎也验证了这一说法,因此我认为这个解释比较合理。
APC激发发射.png
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