阴性峰值变强

zzzlll.

我们在做流式检测的时候遇到了一些问题，就是我们用的是带抗原的微球，在用纯阴性的微球＋标记抗体上机检测后，隐阴性峰在10的3次方左右，但是我用阴性和阳性微球掺了一个25%阳性的微球上机检测后可以看到明显的分群，但是阴性峰的荧光强度明显增强，想问一下该怎么排除可能的原因呢？

                               
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niwanmao

可能的原因：
1. FRET效应：
- 如果阳性和阴性微球非常接近，荧光素之间可能会发生能量转移，导致阴性群体的荧光增加。
2. 粘连：
- 阳性和阴性微球可能正在形成粘连体，导致阴性群体出现假阳性信号。
3.仪器设置：
- PMT电压或其他仪器设置确认是否有变化？

zzzlll.

niwanmao 发表于 2024-7-25 12:09
可能的原因：
1. FRET效应：
- 如果阳性和阴性微球非常接近，荧光素之间可能会发生能量转移，导致阴性群体 ...

非常感谢！第三条目前可以排除，请问第一条和第二条该怎么排除呢？通过fscA-FSC-H圈门排除吗

zzzlll.

niwanmao 发表于 2024-7-25 12:09
可能的原因：
1. FRET效应：
- 如果阳性和阴性微球非常接近，荧光素之间可能会发生能量转移，导致阴性群体 ...

阴性微球不带荧光，应该不会发生FRET效应；并且阴阳群分得很开，感觉第二条也可以排除，请问老师还有什么其他的猜想吗？我们有点绞尽脑汁了/(ㄒoㄒ)/~~

zzzlll.

这个是荧光的分群