最近开始做T细胞相关的实验。请各位有经验的大拿指点一二:
1、关于T细胞转染的问题,请问大家都用什么方式来转染的呢?我用的电转,细胞死的很多,实验做起来很吃力。(文献有用电转,有用lipo3000转,我师兄带我做的是电转)
2、我想往T细胞里面转点mimics观察T细胞亚群分群的影响的。查了一些文献,里面是这样写的 “To evaluate the functionality of the miRNAs upregulated in MS-exosome, CD3 + T cells from healthy donors were transfected with let-7i, miR-19b, miR-25 or miR-92a, and cultured with anti-CD3 and anti-CD28 mAbs for 72h.”没看懂里面写的是先刺激在转染,还是转染的同时加刺激物呢?请问各位大拿是怎么做的?
3、我的预实验:T细胞分选,电转,加刺激剂培养72小时,上流式。inhibited、NC、inNC都比较正常,mimics组的电压好奇怪,会是什么问题的呢?求各位大拿解答。
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