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[标本处理] 凋亡实验中PI阳性分2群

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发表于 2024-8-15 21:45:18 | 显示全部楼层 |阅读模式
悬赏1流星未解决
Annexin V凋亡实验中,PI分为2群,听到有人讲这是由于PI浓度高,染出的2倍体和4倍体?

凋亡.jpg
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发表于 2024-8-15 22:26:29 | 显示全部楼层
单纯就死细胞来说,其中的DNA含量丢失程度不同有可能,但是倍性应该反映不出来吧
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发表于 2024-8-16 08:08:49 | 显示全部楼层
去过黏连了吗?
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发表于 2024-8-16 09:04:30 | 显示全部楼层
可以试试把死细胞单独圈出来做个细胞周期分析
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 楼主| 发表于 2024-8-16 09:22:39 | 显示全部楼层
wxd 发表于 2024-8-16 09:04
可以试试把死细胞单独圈出来做个细胞周期分析

试过了,但是出来的2个峰的荧光强度不是呈现2倍关系
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 楼主| 发表于 2024-8-16 09:23:45 | 显示全部楼层
Yuck 发表于 2024-8-16 08:08
去过黏连了吗?

排除粘连体了,这2群PI阳性的细胞在FSC和SSC中位于FSC变小的那一群,是明显的凋亡的细胞
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发表于 2024-8-16 13:57:05 | 显示全部楼层
罗工培训的时候说过这个情况,因为周期不同
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 楼主| 发表于 2024-8-16 15:41:40 | 显示全部楼层
刘小黑 发表于 2024-8-16 13:57
罗工培训的时候说过这个情况,因为周期不同

不过我把2群圈出来看PI直方图,也没有看到荧光强度呈现2倍的关系。。。罗工的意思是,可以直接把这2群归为晚凋就行,反正不影响结果分析吧,还是需要做一些优化呢?
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发表于 2024-8-19 17:25:02 | 显示全部楼层
wmj123456 发表于 2024-8-16 15:41
不过我把2群圈出来看PI直方图,也没有看到荧光强度呈现2倍的关系。。。罗工的意思是,可以直接把这2群归 ...

您好,问下您有优化的方法吗,我也遇到这样的图了,还以为设备有问题
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