高比例CD4+CD8+双阳性 细胞群

luyexianzong

由于雪貂的种属原因，无CD45,CD3抗体可用，用有交叉反应的GL7 替代CD45，做gate 后， 再用CD4,CD8分区，发现有很高的CD4+CD8+双阳性细胞。
样品处理和对照： PBMC，compensation 用的是单一的抗体染色Beads，因此在compensation时候选用的是阳性Beads 对阴性Beads，另外加上 Unstain cell 和Live-dye staining cell.
用到的抗体包括：GL7, CD4，CD8a, CD11b, F4/80, Ly6C.
请问这个CD4， CD8的分群大概错在哪里？

luyexianzong

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niwanmao

luyexianzong 发表于 2024-9-29 04:40
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CD4、CD8这些门的名称，为什么跟坐标是相反的？例如CD4+这个门，实际上是CD4-CD8+的。是抗体名称写错了？还是门的名称写错了？

至于雪貂的淋巴细胞中CD4、CD8的分群，和人相似的，如下图（图源：
Flow cytometry of ferret peripheral blood leukocytes. Representative... | Download Scientific Diagram (researchgate.net)）

luyexianzong

这个是门标错了。 您这个是引用的2014 Music 的那篇文章的上的图。
我用的抗体是和他一样的，只是标记的荧光不同。 我跟Music交流过，他的CD3的抗体来自Santa Cruz。这个抗体的批次间差异太大，有点问题。我们曾经测试过3个批次的这个抗体，都是无法标记上。 目前已有发表的文献就他这篇文章成功的用过这个抗体。