诺奖给了microRNA，流式在其中的5个应用场景，你了解吗？

niwanmao

昨天傍晚，2024年诺贝尔生理学或医学奖公布，获奖者是维克托·安布罗斯（Victor Ambros）、加里·鲁夫昆（Gary Ruvkun）。表彰他们发现了microRNA及其在转录后基因调控中的作用

自从1993年维克托·安布罗斯及其同事在秀丽隐杆线虫（Caenorhabditis elegans）中发现了第一个miRNA--lin-4（lin-4 通过与其 mRNA 的 3' 非翻译区 (UTR) 的互补结合，抑制 lin-14 基因的表达，从而调节幼虫的发育时间）以来，microRNA的研究起起伏伏，但30多年后，终获诺奖认可，证明了这块领域的含金量。

对于核酸相关的领域，分子生物学是大家熟知的研究手段，但实际上，大家可能不知道的是，流式细胞术已成为microRNA（miRNA）研究中的强大工具，以下是一些主要应用场景，大家了解一下：

1. 高通量筛选
流式细胞术可以快速筛选调控特定基因表达的miRNA。例如，一项研究利用流式细胞术鉴定了10个上调和5个下调人黑色素瘤细胞HLA-DR表面表达的miRNA。这种方法不仅识别了潜在的调控miRNA，还验证了它们对蛋白质和mRNA水平的影响，为了解不同条件下miRNA介导的调控提供了证据[2][8]。

2. miRNA、mRNA和蛋白质的同时检测
2014年，有学者将流式细胞术与RNA荧光原位杂交（FISH）技术相结合，实现了在单细胞水平同时检测miRNA、mRNA和蛋白质[1][5]。这种双重检测能力增强了对细胞功能和相互作用的理解，特别是在免疫细胞研究中，可以同时监测细胞因子的转录和翻译。

3. MicroRNA表达的定量
流式细胞术可使用改良探针定量活细胞中的miRNA水平，这种改良探针提高了检测灵敏度。例如，使用锁核酸（LNA）探针的技术与传统方法相比，显著提高了miRNA检测效率。这一进展有助于在各种生物学背景下精确测量miRNA表达谱[3][4]。

4. 研究细胞外囊泡
流式细胞术还用于研究miRNA释放到细胞外囊泡（EV）中的过程。通过追踪EV中的miRNA，研究人员可以深入了解细胞间通信和miRNA在疾病进程（如癌症进展）中的作用[6][7]。

5. 分析基因表达噪音
该技术可以量化受miRNA影响的基因表达噪音，为理解基因表达波动如何影响细胞行为提供了框架。这一应用对于解析涉及miRNA及其靶基因的复杂调控网络至关重要[4]。


Citations:
[1] https://www.nature.com/articles/ncomms6641
[2] https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC9544904/
[3] https://www.frontiersin.org/journals/bioengineering-and-biotechnology/articles/10.3389/fbioe.2020.619583/full
[4] https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S2666166722000855
[5] https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC3559333/
[6] https://pubs.acs.org/doi/10.1021/acsbiomaterials.3c01459
[7] https://app.jove.com/t/65759/tracking-mirna-release-into-extracellular-vesicles-using-flow-cytometry
[8] https://onlinelibrary.wiley.com/doi/abs/10.1002/eji.202149735