阴性群左移，MFI负值

haohaoxuexi

各位老师好，近期做了个12色PBMC Panel，其中AF647通道反映各细胞群表面某蛋白表达量，其余通道圈死活或各细胞群；
样本为EDTA抗凝食蟹猴，数轮给药，分别测药前及药后个亚群表面AF647-MFI水平；
第一轮给药前后几天测，阴性群都正常分布在0轴附近，近期检测突然发现AF647阴性群左移至-1000左右，导致MFI出现负值，连续两天的检测均如此，样本均新鲜采集；
仪器为fortessa，近期基线未调整，CST均通过，补偿不同老师检查也无问题；在异常实验前仪器调整过BUV通道，换滤光片。除AF647外，其余通道分群无异常。
请教各位老师可能出现的问题？下图左边为之前正常阴性群分布，右图为异常结果。异常实验时带的AF647-FMO显示AF647群仍在0附近，其余管加了AF647反而会左移。