PBMC圈门只有一群细胞是正常的吗

YQM

这是新鲜提取的PBMC放在培养皿里面培养过夜后取上清，贴壁的细胞很少，我用枪吹了一下然后又显微镜看了一下，不太能吹下，所以没有再收集，只要了这些吹下的一点点贴壁细胞和所有上清一起400g离心5min，再铺96孔板（细胞活率90%，浓度是1 million/ml，每孔200ul）进行转染，过了8h先吸20ul上清检测一下转染的RNA有没有表达蛋白，发现PBMC分群不是我看到的帖子里的三群的样子，这是为什么呢，第一次做PBMC，麻烦老师们帮忙看看有没有什么问题

niwanmao

可能因为单核贴壁了，没吹下，只吸了悬液中的淋巴细胞，所以只看到一群

wmj123456

正常情况下，外周血分离的PBMC，主要包括单核和淋巴细胞了，在培养过程中，单核贴壁能力强于淋巴，淋巴主要在上清液中，据你的实验描述，主要取的是上清液的细胞，也就主要收集的淋巴细胞了。流式图中的那群是淋巴细胞，属于正常情况。