巨噬细胞染CD206染不好该怎么解决

yr123

目前在做巨噬细胞M1、M2分型的流式，但是破膜染CD206一直染不好，实验组染出的比例只有1%、2%左右，对照组的比例更低，感觉几乎是没有染上，实验室的其他同学染CD206也是这样，也换了不同通路和好几家公司的抗体都没有解决，想请教一下站内的老师和同学是否有遇到过这样的问题，也有看到文献用CD38/Egr2来代替染CD206去区分M1、M2，也想请教一下各位老师和同学这样染是否可行？谢谢大家

niwanmao

CD206的阳性通常都不是分群明显的，既往的研究里面，M1和M2的区分，通常是通过某种特定物质诱导后，检测各个标记物的强度，看往哪个方向分化，就判断是M1或M2，并非是我们平时想象的CD4、CD8那样分群很好

例如下图，是用健康人外周血PBMC在接受不同处理后CD206表达的差异，分为活性树枝状聚合物1组（a）、GA组（b）或未处理组（c），在没有LPS的情况下培养18小时。文献来源：Erzina, Dina & Capecchi, Alice & Javor, Sacha & Reymond, Jean-Louis. (2021). An Immunomodulatory Peptide Dendrimer Inspired from Glatiramer Acetate. Angewandte Chemie International Edition. 60. 10.1002/anie.202113562.   



不过你做的应该是小鼠的样本。小鼠和人一样，一般用CD206单标，都不太好。所以建议如果要做好小鼠巨噬，可以考虑CD38、Erg2、iNOS、Arg-1多参数可能会更好，参见文献：Jablonski KA, Amici SA, Webb LM, Ruiz-Rosado Jde D, Popovich PG, Partida-Sanchez S, Guerau-de-Arellano M. Novel Markers to Delineate Murine M1 and M2 Macrophages. PLoS One. 2015 Dec 23;10(12):e0145342. doi: 10.1371/journal.pone.0145342. PMID: 26699615; PMCID: PMC4689374.

yr123

好的，谢谢老师