小鼠肿瘤浸润Treg流式求助

AAAZ · 发表于 5 天前

第一个是样品第二个是死活单染简单展示一下这两个图发现CD45分群开始就不太明显这个是补偿和电压的问题吗？抗体、封闭、破核染用的都是biolgend家的，裂红、胶原酶用的是索莱宝的做了70目筛的肿瘤研磨

niwanmao · 发表于 5 天前

看起来似乎都是死细胞

xkx330 · 发表于 4 天前

我觉得应该从解离这步开始找问题，是不是解离的不够好导致细胞活力低。如果现在的解离已经是你的极限了，要不要考虑过一下美天旎 or Stemcells的去死细胞磁珠

AAAZ · 发表于昨天 13:58

xkx330 发表于 2025-3-22 17:03
我觉得应该从解离这步开始找问题，是不是解离的不够好导致细胞活力低。如果现在的解离已经是你的极限了，要 ...

老师您好，我现在的解离就是剪碎肿瘤组织然后使用胶原酶IV和DNA酶I进行消化 37摄氏度30min，之后补1640终止消化用注射器替芯研磨一下之后裂红处理成悬液这个步骤

AAAZ · 发表于昨天 13:59

niwanmao 发表于 2025-3-21 19:24
看起来似乎都是死细胞

处理+破核是不是太久了的原因老师不破核的话能有60%

AAAZ · 发表于昨天 14:02

而且CD45开始就不分群了
导致结果没法用

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