ICS阳性率跟细胞活率有关吗？

pc471

请问各位老师，我做小鼠脾脏细胞ICS，细胞复苏恢复后计数活率有80%~90%，但是加了蛋白（2μg/mL）37℃刺激过夜16h，次日再加BFA阻断4h，上机检测活率只有20%左右，请问有什么办法可以提高活率吗？如果细胞活率太低，那么细胞因子活率会受影响吗？

niwanmao

不加蛋白，37℃过夜16小时是多少活率？

pc471

之前试过细胞复苏放37℃培养瓶过夜，活率只有60多，也试过新鲜细胞37℃不加蛋白铺板过夜，活率有90%，复苏细胞恢复2h后状态也不太好，总体活率比新鲜细胞偏低。

niwanmao

pc471 发表于 2025-3-26 10:11
之前试过细胞复苏放37℃培养瓶过夜，活率只有60多，也试过新鲜细胞37℃不加蛋白铺板过夜，活率有90%，复苏 ...

看来还是细胞本身的问题，复苏后，是否应该培养一段时间，使细胞完全恢复新鲜状态再做此实验