Annexin V和Ki-67同时检测问题

sutt

我想要检测细胞凋亡（Annexin V），同时也想检测Ki-67指标，是否可以同时检测呢？如果染完Annexin V后再固定破膜是不是会造成Annexin V的丢失呢？

niwanmao

可以考虑：
1、先染Annexin V。
2、使用含钙离子的固定剂（例如含2.5 mMCaCl₂的1–2%的多聚甲醛），在固定过程中稳定Annexin V的结合，可避免30~50％的Annexin V丢失。
3、破膜：固定后，对细胞进行破膜处理（例如，使用0.1%的Triton X-100），并进行Ki-67染色。

在此过程中，记得设置对照组（未染色、单一染色）以确认Annexin V的信号保留程度。