有关流式检测细胞数目的问题

ugly

大家好，我先用流式来检测DC的表面标志，我的问题是：我是否可以只用一管实验组和一管对照组来检测呢？还是需要许多管来检测？还有，每管需要的细胞数目或浓度是多少？
我不知道我的问题表达的是否够清楚，但还是请大家不吝赐教，谢谢！

samly0

养DC一周就好了吧，加LPS刺激5天都可以了，时间不算长啊，以前我师妹养记忆性T细胞还差不多一个月呢，如果ugly同学是在养DC的话，建议您可以第二天或者隔一天再取一版DC，重复同样的实验，等上机检测时万一标记不好或者机器故障，第二天或者隔一天又有细胞样本可以上机检测了，这样你第一次做不出的话，不用等太长时间，就算第一次实验很顺利，也相当于再重复一次实验，结果更可信啊

niwanmao

假如你的流式细胞仪可以检测4色，而你要检测的DC标记是4个，那么是可以放在一管实验管里面检测的，同时搭配4个同型对照。

每管细胞浓度一般情况下是1×10⁶/ml，做的时候取100ul加入实验管或对照管（即取1×10⁵细胞做）

ugly

谢谢，我只检测三个表面标志。如果可以在一个管里检测，那么有没有可能检测失败呢，一般需不需要再多做一管，以防万一呢？

niwanmao

ugly 发表于 2012-2-22 20:50

                               
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谢谢，我只检测三个表面标志。如果可以在一个管里检测，那么有没有可能检测失败呢，一般需不需要再多做一管 ...

什么叫检测失败？

ugly

比如细胞数目太少或者标记的不好或者流式细胞仪的原因等，我只是这么假设，因为我的细胞得到需要一个很长的周期，所以很怕出不了结果。

niwanmao

ugly 发表于 2012-2-22 21:13

                               
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比如细胞数目太少或者标记的不好或者流式细胞仪的原因等，我只是这么假设，因为我的细胞得到需要一个很长的 ...

细胞数目可以在标记之前进行细胞计数，保证其足够的数量，这个是可以避免的。

至于标记不好，如果你同时处理，一管标记不好，其它几管同样也会标记不好的。

如果是流式细胞仪出问题了，同样的道理，多做几管也没用。

ugly

恩，有道理，多谢啦，我知道该怎么做了，非常感谢你的回答。

ericxu59

版主好厉害的，高手了。
看到过10ul做实验的，10万个细胞，供您参考哈。
http://blog.merckmilliporechina.com/entry/oneblood2.html

gcz5340

ericxu59 发表于 2012-4-6 14:34

                               
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版主好厉害的，高手了。
看到过10ul做实验的，10万个细胞，供您参考哈。
http://blog.merckmilliporechina. ...

Guava EasyCyte流式细胞仪似乎只能用他们公司自己的试剂，这也限制了他的应用。