血小板活化实验的几点疑问

Belief

我准备做血小板活化指标CD62P CD147；刺激剂用脂蛋白，做了一次实验，现在存在以下疑问：
1，提取血小板方法，在流式CD61/SSC图上血小板群呈现斜向右上的分布，CV值较大；关键是通过对CD62阳性表达的观察；CD62阳性的处于右上角的那群，而中央较规整的群则为阴性表达！这里面的右上角的那块是聚集血小板吗？
2，后来我改用全血法检测血小板；CD61/SSC上图形较提取法好看，较集中；正常对照组没有出现明显的上下两群，而实验组（加入脂蛋白）则有上下两群的现象；那么是不上面一群是聚集血小板呢？下边一群则是散在血小板呢？但是比较两群的CD62的表达情况，没看出明显区别！
3，血小板实验补偿值（FITC-PE)怎么调整比较合适呢？

niwanmao

是否能附上图片或原始数据？看着图片或者亲手分析原始数据更有感觉。

1和2 的问题，我在想，SSC和FSC是否设置为LOG模式？

由于你做的CD62P和CD147即使发生活化，表达也是非常低或者强度很弱，所以直接用他们来调节补偿不太靠谱，我建议你两种做法：1、使用同样的标本，做两个血小板特异性标记，如CD61 FITC、CD42b PE，用这两个抗体的补偿值来做CD62P和CD147的补偿；2、凭经验，把补偿设置为平时获取时的补偿值。

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niwanmao 发表于 2012-5-16 10:52

                               
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是否能附上图片或原始数据？看着图片或者亲手分析原始数据更有感觉。

1和2 的问题，我在想，SSC和FSC是否 ...

都是LOG模式；图片暂且没有！调节补偿值比较麻烦！我暂时还没有PE的血小板标志，只有CD62-PE

niwanmao

Belief 发表于 2012-5-16 16:03
都是LOG模式；图片暂且没有！调节补偿值比较麻烦！我暂时还没有PE的血小板标志，只有CD62-PE ...

那么补偿的调节只能使用你们机器的常用补偿值了。

如果没有图片，最好把原始数据传上来。流式讲究看图说话：）

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niwanmao 发表于 2012-5-16 20:33

                               
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那么补偿的调节只能使用你们机器的常用补偿值了。

如果没有图片，最好把原始数据传上来。流式讲究看图说 ...

已解决！多谢

niwanmao

Belief 发表于 2012-5-18 12:36

                               
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已解决！多谢

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