CFSE细胞增殖分析

浅浅眉

倪老师，晚上好，这个是我用modfit软件分析DNA含量的图，发现圈细胞群的位置和分析的比例有很大关系，不知道这个设门的时候有什么原则？

niwanmao

浅浅眉 发表于 2012-11-23 22:31

                               
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倪老师，晚上好，这个是我用modfit软件分析DNA含量的图，发现圈细胞群的位置和分析的比例有很大关系，不知 ...

看这里：http://www.flowcyto.cn/bbs/thread-243-1-1.html
需要不断调整G2/G1比例，同时观察RCS值变化。

浅浅眉

niwanmao 发表于 2012-11-23 23:06

                               
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看这里：http://www.flowcyto.cn/bbs/thread-243-1-1.html
需要不断调整G2/G1比例，同时观察RCS值变化。 ...

倪老师，我分析的大部分是肿瘤细胞，应该是异倍体吧，G2/G1的比例大致应该是多少？RCS值变化的范围是多少呢？我看了您分析的是整二倍体和肿瘤细胞有区别吗？谢谢。

niwanmao

浅浅眉 发表于 2012-11-24 11:03:46

                               
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[quote]niwanmao 发表于 2012-11-23 23:06 [url=forum.php?mod=redirect&g

分析方法是一样的，先设置fsc-ssc门，再设置fl2a-fl2w门，最后分析倍体。由于你不知道你的肿瘤细胞是否异倍体，所以建议你用鸡红细胞做倍体对照，一般商业化试剂盒中有，如果嫌麻烦，可以加做一个混合了正常二倍体和肿瘤细胞的标本做为对照。

浅浅眉

niwanmao 发表于 2012-11-23 12:31

                               
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死细胞可以用7-AAD来排除

可以试一下，做好了我把图发上来，您给我看看，这样同时染7AAD的时候就可以说明CFSE使细胞死亡的比例了。只是不知道CFSE染色后第二天细胞出现很多碎片，会不会影响实验结果？非常感谢您的帮助。

niwanmao

浅浅眉 发表于 2012-11-24 14:59:47

                               
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[quote]niwanmao 发表于 2012-11-23 12:31 [url=forum.php?mod=redirect&g

碎片可以通过fsc-ssc点图来排除

huzengwu

niwanmao 发表于 2012-11-21 22:53

                               
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能下载的：http://www.flowcyto.cn/bbs/forum.php?mod=redirect&goto=findpost&ptid=1664&pid=6794
会不 ...

比较什么数值？

niwanmao

huzengwu 发表于 2013-1-8 20:45

                               
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比较什么数值？

？？？这是下载modfit的地址啊，没说到比较什么数值

20071271

你用的CFSE的浓度时多少呢，染色条件怎么样，染色后荧光显微镜看过没有？

浅浅眉

20071271 发表于 2013-1-10 14:32

                               
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你用的CFSE的浓度时多少呢，染色条件怎么样，染色后荧光显微镜看过没有？

我用CFSE是商品化的试剂盒，染色后荧光显微镜下观察整个细胞都有非常强的绿色荧光。