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作者：贺龙刚 等 （南方医科大学药学院）细胞与分子免疫学杂志(Chin J Cell Mol Immuno)2012,28(11)
[摘要]
目的:观察HIV-1 gp41融合多肽(FP)能否影响CD3抗体激活的调节性T细胞(Treg)。
方法:用免疫磁珠分离小鼠脾脏CD4+CD25+的Treg、CD4＋CD25－的效应性T细胞(Teff)，丝裂霉素C处理小鼠脾细胞获得APC。通过CCK-8法和羧基荧光素双乙酸盐琥珀酰亚胺酯（CFSE）标记检测FP对CD3抗体刺激的Teff增殖效应分析其对Treg抑制功能的影响;用ELISA检测FP对Treg激活后IL-10分泌的影响;；用激光共聚焦显微镜观察细胞表面FP与TCR的分布。
结果：通过CCK-8法和流式细胞术分析发现,在CD3抗体刺激下,Teff细胞有显著增殖效应;当Treg和Teff混合培养时,Treg能够明显抑制共培养的Teff增殖;当加入25ug/mL FP后，Treg+Teff组与Teff组细胞增殖没有明显变化;当FP浓度为5ug/mL时,Treg+Teff组比Teff组增殖显著降低。Treg未活化时IL-10分泌较低,经过CD3抗体刺激后其IL-10分泌显著增多,而当FP浓度为25ug/mL时IL-10显著下降,5ug/ml FP对IL-10分泌无显著影响。通过激光共聚焦显微镜检测发现Tleg未活化时,T细胞受体(TCR)在细胞表面均匀分布,同时未见FP与TCR共分布;当Treg在CD3抗体刺激下,TCR活化形成半月形,且FP与活化的TCR在细胞表面共分布。
结论:25ug/ml FP对Treg体外抑制功能具有显著抑制作用,而5ug/mL FP不影响Treg的抑制功能,可能与其抑制Treg细胞IL-10分泌以及阻断APC在Treg细胞跨膜区域活化信号的递呈有关。
＝＝＝＝全文见下，感谢@楼楼 版主提供资料＝＝＝＝＝
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，下载需要2颗流星（为什么？） |
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发表于 2013-1-28 21:53:24
