周期分析，这样做对吗？

cccssszzz08

这两天做了一下细胞周期，本来实验进行的都比较顺利。但是在结果分析的时候却遇到了问题。要是选择自动分析的话，就出现了四倍体。选择手动分析的话，G2期却拟合不出来。（BDcalibur， Modfit）
周期结果的图片如下：

control

positive

sample

还有一个问题就是RCS值太高了，是由于什么原因导致的呢？该怎样避免？
另外附上数据 mfl怎么上传啊？

niwanmao

cccssszzz08 发表于 2013-3-17 23:53

                               
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哦，我知道啦！谢谢倪老师。又学会一招。原来手动分析的时候不是必须2倍关系呀！
可是为什么二倍体和四倍 ...

二倍体和四倍体之间是成1:2的关系，G2/M期和G0/G1期的DNA含量也是2:1关系，但是关键是我们获取时由于电压不同，肯定会跟2:1有些差异，所以可以在1.5-2.5:1之间微调，使拟合结果符合实际结果和我们的期望。

niwanmao

你这些标本应该都是二倍体吧？那么就手动分析，调整G0/G1和G2/M峰的位置，从图形拟合结果看，你可能问题出在G2/M峰的位置没放置好。如果上传，建议上传你获取的流式数据文件，不要上传mfl文件，mfl文件只是modfit的一个配置文件。

cccssszzz08

niwanmao 发表于 2013-03-17 10:03:19

                               
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你这些标本应该都是二倍体吧？那么就手动分析，调整G0/G1和G2/M峰的位置，从图形拟合结果看，你可能问题出

我手动分析的时候把G2/M期放对了位置，可是还是不行么！我回去上传文件，您看看吧！

niwanmao

cccssszzz08 发表于 2013-3-17 17:40

                               
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我手动分析的时候把G2/M期放对了位置，可是还是不行么！我回去上传文件，您看看吧！ ...

哦，对，新版本需要不断调节设置中的G2/G1 ratio，直至模型拟合符合峰的分布，并且各诊断参数都在预期范围内。

cccssszzz08

niwanmao 发表于 2013-3-17 17:46

                               
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哦，对，新版本需要不断调节设置中的G2/G1 ratio，直至模型拟合符合峰的分布，并且各诊断参数都在预期范 ...

打包的附件就是我的结果，请倪老师帮忙看看。

niwanmao

cccssszzz08 发表于 2013-3-17 18:52

                               
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打包的附件就是我的结果，请倪老师帮忙看看。

我尝试了几次，发现G2/G1为1.86－1.88之间的数值比较适合，就拟合的比较好。
下图是1.86时的拟合结果。

1.86

cccssszzz08

niwanmao 发表于 2013-03-17 20:40:04

                               
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我尝试了几次，发现G2/G1为1.86－1.88之间的数值比较适合，就拟合的比较好。
下图是1.86时的拟合结果。
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哦，我知道啦！谢谢倪老师。又学会一招。原来手动分析的时候不是必须2倍关系呀！<br />
可是为什么二倍体和四倍体不成1比2呢？